宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌，是危害女性健康的危险因素之一[1]。乳腺癌疾病进展较缓慢，从癌前病变到原位癌再到浸润癌共经历3个阶段，但是由于早期临床症状不明显，诊断较为困难，患者确诊时大多错过最佳治疗时机，导致预后不良[2]。临床确诊宫颈癌的金标准是宫颈组织活检病理，但其为有创性操作，且费用较昂贵，患者接受度较低[3]。经阴道实时剪切波弹性成像（real-time shear wave elastography,SWE）是近些年新兴的超声成像技术，通过肿块硬度的模量值以及剪切波弹性图反映肿块的硬度分布情况，通过病灶组织弹性差异进一步鉴别病灶良恶性[4]。但受病灶位置以及肿瘤大小的影响，影像学诊断存在一定的误诊漏诊，因此需联合血清学指标提高诊断的效能。相关研究表明，双皮质素样激酶1(double cortin-like kinase 1,DCLK1）在宫颈癌患者体内水平升高，与淋巴结转移及病理分期有关，对患者预后具有一定的预测价值[5]。潜在转化生长因子结合蛋白2(latent transforming growth factor binding protein 2,LTBP2）在老年宫颈癌患者体内水平上升，对宫颈癌手术前后病情评估具有一定的临床价值[6]。由此可见，血清DCLK1、LTBP2均可作为诊断宫颈癌的潜在血清学指标，但关于血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE在宫颈癌患者早期诊断中的价值目前尚不清楚。基于此，本研究探讨血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE在宫颈癌患者早期诊断中的价值，旨在为宫颈癌早期诊断提供新的思路。

1、资料与方法

1.1临床资料

选取2021年8月至2022年12月于本院就诊的宫颈病变患者155例为研究对象，经组织活检确诊为宫颈癌患者75例（宫颈癌组），宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neosplasia,CIN）患者80例（CIN组）。宫颈癌组患者年龄（53.69±6.08）岁；BMI(23.62±2.98)kg/m2;HPV高危分型：HPV 16型53例，HPV 18型13例，其他型9例；FIGO分期：ⅠB期32例，ⅡA期43例。CIN组患者年龄（53.25±6.36）岁，BMI(23.07±2.71)kg/m2。另取同期于本院体检的无宫颈相关疾病志愿者80例作为对照组，年龄（52.88±6.22）岁，BMI(22.98±2.34)kg/m2。3组受试者年龄、BMI、妇科疾病史比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。纳入标准：符合宫颈癌组织病理学相关诊断标准[7];CIN患者符合相关诊断标准[8]；行经阴道SWE检查；患者均行宫颈锥切术治疗。排除标准：合并其他恶性肿瘤；有放疗、化疗及宫颈手术史；伴有心、肝、肾功能不全；凝血功能障碍。本研究符合世界医学协会《赫尔辛基宣言》，经本院伦理委员会审核批准（批准号：202107041509），患者及家属均对本研究知情同意。

1.2血清DCLK1和LTBP2水平检测

对照组受试者在体检当天空腹采集静脉血，CIN组患者在入院后第2天采集静脉血，宫颈癌组患者在入院第2天及术后1、3、6个月空腹采集静脉血4 mL，经离心后，收集上清液即为血清，保存待用。采用ELISA法检测血清DCLK1、LTBP2水平。血清DCLK1、LTBP2阳性诊断标准：血清DCLK1水平>1.49 ng/mL、血清LTBP2水平>19.02µg/mL。

1.3经阴道SWE检查

所有检查对象排空膀胱，取截石位，探头缓慢进入阴道后轻触宫颈口表面，先使用彩色多普勒超声诊断仪行常规二维超声检查（图1），设定3～12 MHz的频率，观察宫颈病灶数量、大小、形态、位置、边界等情况，筛选病变的重点观察区域，切换SWE模式，设置最大弹性模量为150 kPa，等待3～5 s，确保彩色完全填充且图像稳定，冻结图像，统一设定直径为3 mm，通过Q-BOX定量分析系统测量最大弹性模量，重复测量3次求平均值。所有检查均由2名具有5年经验的超声科医师进行，所有患者均使用同一台仪器进行检查。经阴道SWE阳性诊断标准：最大弹性模量>32 kPa且平均弹性模量>27.22 kPa。

图1宫颈癌典型诊断图

a：宫颈（以后唇为主）35 mm×43 mm，术后诊断为宫颈鳞状细胞癌ⅠB2期；b：宫颈（以前唇为主）19 mm×12 mm，术后诊断为宫颈鳞状细胞癌ⅠB1期

1.4观察指标

比较宫颈癌组、CIN组及对照组受试者血清DCLK1、LTBP2水平；比较宫颈癌患者手术前后血清DCLK1、LTBP2水平；比较宫颈癌组、CIN组及对照组受试者经阴道SWE弹性模量。

1.5统计学方法

采用SPSS 21.0软件进行数据分析，计数资料以频数或百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验（进一步两两比较采用分割χ2检验），采用Bonferroni法校正。计量资料均符合正态分布，以均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用单因素方差分析（进一步两两比较采用SNK-q检验）。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线分析血清DCLK1、LTBP2对宫颈癌的诊断价值；采用四格表法分析血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE对宫颈癌的诊断价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1血清DCLK1、LTBP2水平比较

宫颈癌组患者血清DCLK1、LTBP2水平显著高于CIN组及对照组（P<0.05);CIN组与对照组受试者血清DCLK1、LTBP2比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

表1血清DCLK1、LTBP2水平比较（±s)

2.2宫颈癌患者手术前后血清DCLK1、LTBP2水平比较

与术前相比，宫颈癌患者术后1、3、6个月的血清DCLK1、LTBP2水平逐渐下降，各时间点两两比较差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2宫颈癌患者手术前后血清DCLK1、LTBP2水平比较（±s)

2.3血清DCLK1、LTBP2水平诊断宫颈癌的价值

血清DCLK1诊断宫颈癌的曲线下面积为0.868(95%CI:0.804～0.917），敏感度为86.67%，特异度为81.25%，最佳截断值为1.49 ng/mL；血清LTBP2诊断宫颈癌的曲线下面积为0.754(95%CI:0.679～0.820），敏感度为78.67%，特异度为60.00%，最佳截断值为19.02µg/mL，见图2。

图2血清DCLK1、LTBP2水平诊断宫颈癌的ROC曲线

2.4经阴道SWE弹性模量比较

宫颈癌组患者宫颈病灶组织的最大弹性模量、平均弹性模量均显著高于CIN组和对照组（P<0.05),CIN组与对照组受试者病灶组织最大弹性模量、平均弹性模量比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表3。

表3经阴道SWE弹性模量比较（±s,kPa)

2.5血清DCLK1、血清LTBP2、经阴道SWE及三项联合诊断宫颈癌结果

经阴道SWE检查，宫颈癌阳性70例，阴性85例，与金标准具有一致性（P<0.05）；血清DCLK1、LTBP2诊断宫颈癌的阳性率分别为86.67%(65/75）、78.67%(59/75），与金标准均具有一致性（P<0.05）；三项联合诊断宫颈癌的阳性率为97.33%(73/75），与金标准的一致性较高（P<0.05），见表4。

表4血清DCLK1、血清LTBP2、经阴道SWE及三项联合诊断宫颈癌结果（例）

2.6各种方式对宫颈癌的诊断效能比较

三项联合诊断宫颈癌的敏感度、准确度均显著高于血清DCLK1、血清LTBP2、经阴道SWE单一指标诊断（P<0.05），三项联合诊断宫颈癌的特异度显著高于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断（P<0.05），三项联合的误诊率均显著低于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断（P<0.05），见表5。

表5各种方式对宫颈癌的诊断效能比较（%）

3、讨论

宫颈癌的发生多见于过早性行为、多孕多产、多个伴侣以及免疫功能低下的女性，主要表现为阴道排液、接触性出血及持续流血等，具有一定的遗传倾向。宫颈癌发病原因较复杂，CIN是宫颈癌发生的前提，其早期Ⅰ级可随时间推移自行消退，Ⅱ～Ⅲ级则有5%～12%可能发展为宫颈癌[9]。目前宫颈癌的发病率呈逐渐增加趋势，严重威胁患者生命健康，因此，寻找宫颈癌诊断的特异性指标，并明确其发病机制是临床研究的热点。

DCLK1属于一种丝氨酸和苏氨酸激酶，其与大脑或胚胎发育时脑相关信号转导和神经元损伤有关[10]；同时，其与胰腺上皮病变组织的特异性标志物协同表达，促使上皮细胞微绒毛结构消失，增加了胰腺癌的发生风险[11]。除此之外，DCLK1还参与结直肠癌、胆管癌、食管鳞癌的发生发展[12]。李伟枫等[5]发现，DCLK1水平升高对宫颈癌的形成具有一定的促进作用，且与病理恶性程度密切相关。王雯智等[13]发现，DCLK1与临床分期、淋巴结转移、浸润深度密切相关，不仅参与宫颈癌的进展，还与宫颈癌病情严重程度显著相关，提示DCLK1参与宫颈癌的发生发展。本研究在此基础上进行验证，结果显示，宫颈癌患者血清DCLK1水平显著高于CIN患者及健康受试者，且与术前比较，宫颈癌患者术后1、3、6个月血清DCLK1水平逐渐下降，证实了DCLK1参与宫颈癌形成过程，发挥促癌功能。于晓等[14]指出，宫颈癌患者放疗后的血清DCLK1水平显著低于放疗前，放疗或手术可以有效控制肿瘤进展，通过监测该指标水平可以判断疾病转归，本研究结果与之类似。分析原因为宫颈癌患者体内癌细胞促进DCLK1启动子的激活及进一步的转录翻译，导致血清DCLK1水平上升；而手术切除大量肿瘤细胞后，肿瘤细胞减少进而导致DCLK1分泌减少[15]。另外，本研究ROC曲线分析显示，血清DCLK1诊断宫颈癌的曲线下面积为0.868，截断值为1.49 ng/mL，敏感度为86.67%，特异度为81.25%，提示DCLK1对宫颈癌具有一定的诊断价值，当血清DCLK1水平高于1.49 ng/mL时，提示CIN患者有进一步发展为宫颈癌的风险，临床医师应及时诊断和调整治疗策略，防止疾病进展。

LTBP2是一种胞外分泌蛋白，并参与细胞外基质的组成，在弹性纤维聚集及细胞黏附等生物学活动中至关重要，其参与肝癌、子宫内膜癌及乳腺癌的发病过程[16-17]。唐固平等[6]发现，LTBP2在宫颈癌患者体内水平增加，与宫颈癌临床分期及淋巴结转移等病理特征密切相关。本研究结果显示，宫颈癌患者血清LTBP2水平显著高于CIN患者及健康受试者，且与术前比较，宫颈癌患者术后1、3、6个月的血清LTBP2水平逐渐下降，提示LTBP2表达水平的上升增加了宫颈癌的发病风险。本研究ROC曲线分析显示，血清LTBP2诊断宫颈癌的曲线下面积为0.754，截断值为19.02µg/mL，提示血清LTBP2对宫颈癌具有一定的诊断价值，当血清LTBP2水平高于19.02µg/mL时，CIN患者有进一步发展为宫颈癌的可能，临床医师应及时诊断并调整治疗方案，防止病情进一步发展。另外，本研究结果显示，血清LTBP2诊断宫颈癌的敏感度为78.67%，特异度仅为60.00%，说明单一LTBP2并不能很好地诊断宫颈癌，需要联合其他诊断方式提高诊断的特异度，降低误诊率。

宫颈癌的主要检查方式包括白带常规检查、HPV检查、宫颈细胞学检查，但以上方法难以确定早期肿瘤侵犯范围。虽然病理学检查是宫颈癌诊断的金标准，但其具有有创性，患者接受度较低。影像学技术可大大提高宫颈癌的诊断效能，经腹部超声检查对于宫底大型包块具有良好效果，但其对组织穿透力低，对较小病灶的检出效果较差，不能有效区分良恶性，误诊率和漏诊率较高[18]。与经腹部超声检查相比，经阴道超声检查探头频率较高，与宫颈距离缩短，可以清晰辨别宫颈内部结构，对血流信号更加敏感，更容易测出血流频谱，能够有效突破患者胃肠气体较多、膀胱充盈程度较差、腹部过厚等的限制[19]。但经阴道超声检查对患者性生活史、阴道异常及身体情况要求较高，具有一定的局限性。经阴道SWE是一种在超声成像基础上新兴的超声技术，通过检测组织的弹性模量来反映组织的硬度，具有无创、简便、可实时测量等优点，对于早期宫颈癌具有一定的诊断及评估价值。生物组织的弹性是指经外力作用后恢复原始形状的能力，当机体出现肿瘤时，组织性质和硬度发生变化，弹性成像是在视觉上唯一可以展示组织硬度信息的方法，通过弹性模量判断组织硬度，弹性模量越大，对应的局部组织硬度越大。李小利等[20]发现，宫颈癌患者最大弹性模量和平均弹性模量均远远高于健康受试者，且最大弹性模量对早期宫颈癌诊断的敏感度为88.00%，特异度为78.00%。曾曼婷等[21]发现，最大弹性模量及平均弹性模量临界值为100.08 kPa、95.7 kPa时诊断宫颈病变的敏感度为81.00%，特异度为90.00%。以上结果说明，最大弹性模量和平均弹性模量可有效诊断宫颈病变及宫颈癌。本研究结果亦显示，宫颈癌组患者宫颈病灶组织的最大弹性模量、平均弹性模量均显著高于CIN组，且经阴道SWE诊断宫颈癌的敏感度为82.67%，特异度为90.00%，与陶玉华等[22]的研究结果相似。但不同病变组织的弹性系数可能会存在一定的重叠，因此研究的可重复性存在一定的局限性。本研究将血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE诊断宫颈癌，结果显示，三项联合的特异度显著高于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断，误诊率低于血清DCLK1、LTBP2单一指标诊断，提示血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE诊断宫颈癌具有较高的效能。

综上所述，血清DCLK1、LTBP2联合经阴道SWE在宫颈癌诊断中具有较高的临床应用价值，进一步提升了诊断的敏感度、准确度，降低了误诊率。但本研究为单中心研究，样本量偏小，结果可能存在偏倚，后期将加大样本量，扩大取样范围，进行更深入的研究。

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基金资助:西安市科技计划项目[20YXYJ0005(1)];

文章来源:王君,徐宁,关三丽,等.血清DCLK1､LTBP2联合经阴道实时剪切波弹性成像对宫颈癌的早期诊断价值[J].局解手术学杂志,2024,33(11):1009-1014.