首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 医学毕业论文 > 医学本科毕业论文 > 验证XN-2000型血细胞分析仪的性能及评价分析

验证XN-2000型血细胞分析仪的性能及评价分析

2020-08-21 977 上传者：管理员

摘要：目的验证XN-2000型血细胞分析仪的性能是否满足检测需要。方法收集临床血液样本及试剂盒质控品，参照国家卫生行业标准WS/T 406-2012检测白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板，从本底计数、携带污染率、批内精密度、批间精密度、正确度、准确度、线性范围等方面进行性能验证及方法学评价。结果 XN-2000型血细胞分析仪的白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板本底平均值≤0.33，携带污染率≤0.76%，批内精密度变异系数0.67%～2.63%，日间精密度变异系数0.46%～1.31%，平均偏倚均在1.00%以内，最大相对偏差为8.18%，线性范围验证显示，a=0.95～1.05，相关系数R2≥0.998，均在行业标准质量要求的范围内。结论 XN-2000型血细胞分析仪的方法学性能可靠，能满足检测需求。

关键词：
性能验证
检测需求
正确度
精密度
血细胞分析仪
加入收藏

血细胞分析仪是医学实验室最基本的仪器，主要用于血细胞分类计数，其性能直接影响到检验结果，从而影响疾病诊断。性能验证是指对他人或仪器厂商提供的评价资料中主要性能指标的核实[1]。《医疗机构临床实验室管理办法》[2]要求新购置仪器设备在进入临床使用前，实验室应对其主要性能指标进行评价，以达到验证仪器结果可靠性的目的。CNAS-CL02:2012[3]也要求检验实验室应对仪器设备、检测系统或检验方法的性能指标进行验证。本研究依据卫生行业标准WS/T 406—2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》[4]（以下简称“行业标准”）、WS/T 408—2012《临床化学设备线性评价指南》[5]，探讨Syemex公司生产的血细胞分析仪XN-2000性能验证方案，评估其检测白细胞（white blood cell,WBC）、红细胞（red blood cell,RBC）、血红蛋白（hemoglobin,HGB）、血小板（platelet,PLT）、血细胞比容（hematocrit,HCT）、平均红细胞体积（mean corpuscular volume,MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin,MCH）、平均红细胞血红蛋白浓度（mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC）等指标性能，为需要购买或正在使用该仪器的同行提供参考。

1、材料与方法

1.1材料

1.1.1样本来源

涟水人民医院门诊、住院患者及本院体检职工全血，均采用EDTA-K2抗凝。

1.1.2仪器

XN-2000血细胞分析仪为日本Syemex公司产品，稀释液、溶血素、染液、清洗液等均为Syemex原装试剂，并采用配套的质控品。

1.2方法

1.2.1本底计数

用仪器配套稀释液作为样本，在XN-2000血细胞分析仪上连续检测3次，检测项目包括WBC、RBC、HGB、PLT，检测方法参照《全国检验操作规范（第四版）》[6]。最大值应符合行业标准要求[4]:WBC≤0.5×109/L,RBC≤0.05×1012/L,HGB≤2 g/L,PLT≤10×109/L。

1.2.2携带污染率

对WBC、RBC、HGB、PLT共4个拟验证指标，分别取高浓度（WBC>90×109/L,RBC>6.2×1012/L,HGB>220 g/L,PLT>900×109/L）和低浓度（WBC<3×109/L,RBC<1.5×1012/L,HGB<50 g/L,PLT<30×109/L）的血液样本各1份，按标准操作规程各连续检测3次，结果分别记为H1、H2、H3和L1、L2、L3。携带污染率=（L1-L3）/（H3-L3）×100%，要求：WBC≤3.0%,RBC≤2.0%,HGB≤2.0%,PLT≤4.0%。

1.2.3批内精密度

取1份检验结果在正常参考范围的血液样本，上下颠倒混匀8次后上机检测，重复检测20次，计算20次检测结果的变异系数（CV）。判断标准：WBC≤4.0%、RBC≤2.0%、HGB≤1.5%、HCT≤3.0%、PLT≤5.0%、MCV≤2.0%、MCH≤2.0%、MCHC≤2.5%。

1.2.4日间精密度

取正常参考范围（中值）、高于参考范围（高值）2个浓度的质控品，按《全国检验操作规范（第四版）》[6]每天检测1次，连续检测1个月，剔除并纠正失控数据，计算变异系数（CV）。判断标准：WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的CV分别≤6.0%、2.5%、2.0%、4.0%、8.0%、2.5%、2.5%、3.0%。

1.2.5正确度

选取10份结果在正常参考范围的血液样本，各检测2次，计算平均值。以江苏省临检中心室间质评成绩优良的操作系统作为标准，计算偏倚。行业标准要求WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的CV分别≤5.0%、2.0%、2.5%、2.5%、6.0%、3.0%、3.0%、3.0%。

1.2.6准确度

取5份质控品分别检测，计算每份样本检测结果与靶值的相对偏差。判断标准：WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的相对偏差分别≤15.0%、6.0%、6.0%、9.0%、20.0%、7.0%、7.0%、8.0%。

1.2.7线性范围

选取各指标高浓度血液样本各1份，分别按100%、80%、60%、40%、20%的比例稀释，每个稀释度检测3次，计算平均值。根据实测值和理论值构建直线回归方程，验证线性范围。行业标准要求a=1.0±0.05，相关系数R2≥0.95。

2、结果

2.1本底计数

用稀释液作为样本重复检测3次，WBC、RBC、HGB本底值均为0,PLT检测3次的本底平均值为0.33，符合行业标准（表1）。

表1本底计数结果

2.2携带污染率

WBC、RBC、HGB、PLT等4个指标携带污染率分别为0.02%(0.02/90）、0.76%(0.04/5.25）、0(0/270）和0.10%(1/975），符合行业标准要求。

2.3批内精密度

根据20次检测数据分别计算均数、标准差及变异系数，WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的CV分别为6.0%、2.5%、2.0%、4.0%、8.0%、2.5%、2.5%、3.0%，符合行业标准要求（表2）。

表2批内精密度结果

2.4日间精密度

日间精密度验证显示，WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC中值质控品的CV分别为0.46%、0.68%、1.03%、0.64%、0.69%、1.02%、1.26%、1.31%，高值质控品的CV分别为1.07%、0.61%、0.68%、0.91%、0.69%、1.10%、0.81%、1.09%，均在行业标准要求范围内（表3，表4）。

表3中值质控品日间精密度验证结果

表4高值质控品日间精密度验证结果

2.5正确度

通过20次检测，计算偏倚，8个验证指标最大偏倚为0.7%，均低于行业标准（表5）。

表5正确度偏倚结果

2.6准确度

1～5号共5份质控品的相对偏差见表6,WBC、RBC、HGB、HCT、PLT、MCV、MCH、MCHC的最大相对偏差分别为5.08%、3.08%、1.55%、7.84%、8.18%、-6.79%、2.10%、-7.27%，均在行业标准允许的范围内。

表6准确度验证结果

2.7线性范围

线性范围验证显示，a值均在0.95～1.05范围内，相关系数R2≥0.998，线性范围在行业标准范围内，如表7所示。

表7线性范围验证结果

3、讨论

性能验证不仅是实验室规范化建设的需要，也是保证仪器设备在检验工作中处于最佳的工作状态、保证检验结果准确可靠的保证[7]。ISO 15189为性能验证提供了基本的准则，但具体选择哪些指标、如何操作实施，不少实验室仍不知所措。通常，仪器厂商也提供性能验证方案，但往往因偏重于建立产品的性能参数、操作复杂不利于临床常规开展[8]。如何用简单有效的方法进行性能验证从而保证检验质量，是实验室管理亟待解决的问题。XN-2000型血细胞分析仪采用流式细胞术（FCM）和电阻抗技术原理进行血细胞计数，除传统的五分类细胞计数外，还可进行原始细胞、幼稚细胞、有核红细胞及体液细胞分析[9]。为了保证检验结果准确可靠，本研究从本底计数、携带污染率、精密度、正确度、准确度及线性范围几方面对其进行性能验证。

本底计数是指没有进样时仪器检测到的信号值，XN-2000血细胞分析仪本底计数符合要求，表明仪器稳定，对检测结果干扰小。携带污染是指不同浓度样本连续检测，前一次检测结果对后一次检测造成的影响，以相对偏差表示[10]。本研究显示WBC、RBC、HGB、PLT的携带污染率均≤1%，在行业标准范围之内，说明高值、低值血液样本之间相互影响较小。精密度是多次独立重复检测结果之间的一致性，反映测量结果的可重复性，包括批内精密度和日间精密度，通常以方差、标准差或变异系数来表示[11,12]。本研究显示批内精密度变异系数、中值质控品日间精密度变异系数、高值质控品日间精密度变异系数均符合行业标准，表明XN-2000血细胞分析仪精密度高，重复性好。正确度是多次检测结果的平均值和靶值间的接近程度，以偏倚为评价指标[13]。验证结果显示，各指标的平均偏倚均在1%以内，远低于行业标准，说明该检测系统性能稳定，结果准确，达到质量要求。准确度以总误差为评价指标，常用相对偏差表示[4]，验证显示5份质控品相对偏差均在行业标准规定的范围内。线性范围是样本经稀释、浓缩或其他处理后报告的结果范围，一般血液分析仪都提供一个检测范围，实验室应根据实际情况验证出本室使用的线性范围[14,15]。本研究采用稀释方法进行验证发现WBC、RBC、HGB、PLT线性范围能满足临床需求，理论值与实测值作线性回归，a均在1±0.05内，相关系数R2≥0.95，线性较好。

4、结论

本研究采用的XN-2000血细胞分析仪的空白干扰极低，样本间交叉污染小，正确度高，精密度好，线性范围宽广，性能稳定，与仪器说明书提供的检验性能基本一致，可用于临床标本的检测。另外，本研究建立的的性能验证方案操作简便，实用性强，对建立标准、规范的血细胞分析仪性能验证具有重要意义。

参考文献：

[2]中华人民共和国卫生部.医疗机构临床实验室管理办法[Z].北京:中华人民共和国卫生部,2006.

[3]中国合格评定国际认可委员会.医学实验室质量和能力认可准则CNAS-CL02:2012[S].北京:中国标准出版社,2012.

[4]中华人民共和国卫生部. WS/T 406-2012临床血液学检验常规项目分析质量要求[S].北京:中国标准出版社,2012.

[5]中华人民共和国卫生部.WS/T 408-2012临床化学设备线性评价指南[S].北京:中国标准出版社,2012.

[6]尚红,王毓三,申子瑜,等.全国临床检验操作规程(第4版)[M].北京:人民卫生出版社,2014.

[7]方翔,项国谦,寿明霞,等.全自动酶免分析仪在肝炎酶联免疫吸附试验中的应用评价[J].中华全科医学,2018,16(8):1338-1341.

[8]康凤凤,王治国.ISO 15189:2012与临床检验定量检测方法确认和性能验证[J].临床检验杂志,2013,31(12):881-884.

[9]刘宏.不同血细胞分析仪检测结果的比对分析[J].四川解剖学杂志,2018(2):41-42.

[10]陆红,李臣宾,周文宾,等.《临床血液学检验常规项目的分析质量要求》的适用性评价[J].现代检验医学杂志,2014,29(3):169-172.