冠心病起病急、进展迅速、并发症多，严重威胁人们生命安全[1]。准确评估冠心病患者病情的严重程度和预后对指导临床治疗具有重要参考价值。炎症反应异常所致的动脉粥样硬化参与冠心病的发生与发展[2],血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)是人体中的黏附因子，能够促进嗜酸性粒细胞、单核细胞等内皮细胞的黏附、聚集，参与冠心病的炎症过程[3]。miR-145表达上调可通过靶向作用于胞质内斑块中的泡沫细胞，抑制其向巨噬细胞极化，从而在动脉粥样硬化发生和发展过程中起到关键的抑制作用；另外，miR-145能够调节炎性反应，对动脉粥样硬化的发展产生影响；miR-145还能促进凋亡相关的基因表达，抑制增殖并促进细胞周期进程，进一步在动脉粥样硬化发生、发展及稳定性中发挥重要作用[4]。半乳糖凝集素-3(Gal-3)作为中介物参与人体炎症反应，与冠心病、心力衰竭、心房颤动的疾病过程密切相关[5]。动脉粥样硬化与脂肪细胞因子平衡失调密切相关，分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)是近年来发现的抗炎脂肪细胞因子[6]。本研究主要探讨冠心病患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平变化及意义。

1、对象与方法

1.1 研究对象

选取2021年3月—2022年7月上海交通大学医学院附属第九人民医院收治的冠心病患者80例为冠心病组。其中，男45例，女35例；年龄38～75岁，平均(58.49±8.07)岁；平均体质量指数(24.15±2.40)kg/m2。另收集健康志愿者40名为健康对照组，其中，男23名，女17名；年龄41～70岁，平均(57.83±7.51)岁；平均体质量指数(23.80±2.61)kg/m2。一般资料在两组患者间比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会审核批准，患者知情同意。

入选标准：冠脉造影检查显示1支及以上主要冠脉狭窄程度大于50%;无冠脉介入治疗史、冠脉搭桥手术史；完成1 a随访。

排除标准：存在严重感染性疾病、免疫系统功能异常者；合并精神疾病、脑卒中者。

1.2 方 法

1.2.1 血清VCAM-1、Gal-3、SFRP5水平检测

采集冠心病患者和健康志愿者的清晨空腹肘静脉血，分为两份，一份用于miR-145表达水平检测；另一份用于血清VCAM-1、Gal-3、SFRP5水平检测，3 000 r/min离心20 min, 离心温度4 ℃,酶联免疫吸附法测定血清VCAM-1、Gal-3、SFRP5水平。

1.2.2 RT-PCR检测血清miR-145表达水平

取血液标本，3 000 r/min离心20 min, 离心温度4 ℃,收集血清，Trizol提取总RNA,使用反转录试剂盒合成cDNA。PCR扩增按照试剂盒说明书进行。以U6为内参基因，引物序列由上海捷瑞生物工程有限公司合成，miR-145上游引物5′-CTGACACGAAAGTTGCAGGCATC-3′,下游引物5′-GAGG GGTCCGCATGCTCATGCACTGCAT-3′;内参U6上游引物5′-TTTCGCCGATTCTAAGACCGACGCA-3′,下游引物5′-AATCAAATAACGACTCTCCGCATGT-3′。PCR反应体系20 μL,反应条件：95 ℃预变性2 min, 94 ℃变性40 s, 55 ℃退火40 s, 共40个循环。相对定量法计算miR-145表达水平。

1.2.3 冠状动脉造影检查和资料收集

采用穿刺股动脉法进行选择性冠脉造影，显示左冠脉和右冠脉情况。冠脉病变支数判断标准：冠脉狭窄程度50%及以上的病变累及左前降支、回旋支或右冠脉的支数；分为单支病变、双支病变、多支病变。收集两组受试者人口学特征及冠心病患者低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯、空腹血糖、维生素B12、叶酸水平。

1.2.4 随访与分组

对冠心病患者进行1 a随访，随访方式：每月进行1次电话随访，每季度进行1次门诊随访，记录不良预后发生情况(病情加重再入院、死亡),分为预后良好组和预后不良组。

1.3 统计学分析

应用SPSS 25.0对数据进行处理与统计学分析。本研究中计量资料均符合正态分布，以均数±标准差(x¯±s)

表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q检验；两组间样本均数比较采用两独立样本t检验；计数资料以n(η/%)表示，以χ2检验进行组间比较，同时进行多因素Logistic回归分析、ROC曲线分析。P<0.05为差异具有统计学意义。

2、结果

2.1 各组患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

本研究结果显示，冠心病组患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于健康对照组，miR-145、SFRP5水平明显低于健康对照组(P<0.01),见表1。

2.2 各亚组冠心病患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

本研究结果显示：血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平在稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、急性心肌梗死组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。其中，急性心肌梗死组患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛组患者，不稳定型心绞痛组患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于稳定型心绞痛组(P<0.05);急性心肌梗死组患者血清miR-145、SFRP5水平明显低于不稳定型心绞痛组、稳定型心绞痛组患者，不稳定型心绞痛组患者血清miR-145、SFRP5水平明显低于稳定型心绞痛组(P<0.05),见表2。

表1 各组患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

表2 各亚组冠心病患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

2.3 不同冠脉病变支数患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

本研究结果显示：多支病变患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于双支病变和单支病变患者，双支病变患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于单支病变患者(P<0.05);多支病变患者血清miR-145、SFRP5水平明显低于双支病变和单支病变患者，双支病变患者血清miR-145、SFRP5水平明显低于单支病变患者(P<0.05),见表3。

2.4 不同预后冠心病患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

本研究结果显示，预后不良组患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显高于预后良好组患者，miR-145、SFRP5水平明显低于预后良好组患者(P<0.01),见表4。

2.5 不同预后冠心病患者人口学特征及临床指标

预后不良组患者中吸烟比例、空腹血糖明显高于预后良好组(P<0.01);年龄、性别、体质量指数及低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯、维生素B12、叶酸水平在两组患者间比较差异无统计学意义(P>0.05),见表5。

2.6 冠心病患者预后多因素Logistic回归分析

以冠心病患者预后情况为因变量(预后不良=“1”,预后良好=“0”),VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5、吸烟、空腹血糖水平为自变量(赋值见表6)进行多因素Logistic回归分析。结果显示，VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5是冠心病患者预后的独立影响因素，见表7。

表3 不同病变支数患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

表4 不同预后冠心病患者血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平

表5 两组冠心病患者人口学特征及临床指标

表6 自变量赋值

表7 冠心病患者预后多因素Logistic回归分析

2.7 血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5对冠心病患者预后的预测价值

构建的ROC曲线显示，血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平对冠心病患者预后具有较高的预测价值(P<0.01)。将血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5纳入Logistic回归模型，结果显示，血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5联合检测的预测价值最高(AUC=0.928),见表8、图1。

表8 血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5对冠心病患者预后的预测价值

图1 血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平 对冠心病患者预后预测价值的ROC曲线

3、讨论

冠心病是最常见的心血管疾病之一，在我国发病率呈逐年上升趋势，预防急性冠脉事件、改善患者预后是临床关注的热点。相关研究[7]显示，糖尿病、高血压等不良事件与冠心病患者不良预后密切相关，但在预后评估中的准确度偏低。准确评估冠心病患者病情和预后在治疗方案的合理制定中具有重要的参考价值，本研究中，冠心病患者血清VCAM-1、Gal-3水平升高，miR-145、SFRP5水平降低。相关研究[8]显示，冠心病发病早期血清VCAM-1高表达，能够激活巨噬细胞，加速平滑肌细胞增殖和动脉斑块形成。炎症、脂质浸润、免疫机制参与动脉粥样硬化的发生与发展，miR-145参与调控血管平滑肌的增殖、迁移，调节血管紧张度，抑制炎症反应，起到保护细胞的作用[9]。Gal-3是一种炎症信号调节因子，在大鼠动脉粥样病变组织中表达水平明显升高[10]。敲除高脂喂养的ApoE基因缺陷大鼠Gal-3基因后，大鼠动脉病变程度较未敲除Gal-3基因大鼠明显减轻[11]。SFRP5在脂肪组织中高表达，参与胰岛素抵抗、肥胖的发生与发展，同时还具有抑炎活性，是一个具有抗炎作用的脂肪因子[12]。SFRP5可通过Wnt信号通路发挥生物学作用，调控间充质细胞、胰岛素信号系统、炎症反应活性[13]。结合本研究结果可知，冠心病患者血清VCAM-1、Gal-3水平高表达，miR-145、SFRP5水平低表达，VCAM-1、Gal-3、miR-145、SFRP5水平可能参与病情的发生与发展。

本研究结果显示，血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平在稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、急性心肌梗死组患者间有明显差异(P<0.05),其中，急性心肌梗死组患者血清VCAM-1、Gal-3水平最高，miR-145、SFRP5水平最低，其次为不稳定型心绞痛组患者，可作为参考指标用于冠心病分类。随着冠脉病变支数的增加，血清VCAM-1、Gal-3水平明显升高，miR-145、SFRP5水平明显减低(P<0.05),提示血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平可用于冠脉病变严重程度的评估。多因素Logistic回归分析显示，VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平是冠心病患者预后的独立影响因素，预后不良组患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显升高，miR-145、SFRP5水平明显降低(P<0.05)。动脉粥样硬化是一种动脉壁病变，主要特点是动脉内膜出现脂质沉积、纤维化、斑块形成和动脉狭窄，炎症反应在这个过程中发挥了关键作用[14]。在动脉粥样硬化早期，炎症反应主要表现为动脉内膜的损伤和修复；损伤的内膜容易吸引血液中脂质沉积，进而引发免疫反应，导致炎症细胞浸润；这些炎症细胞释放多种炎性介质和细胞因子，刺激平滑肌细胞迁移和增殖，促使斑块形成。随着斑块进展，炎症反应进一步加剧；斑块内部的炎症细胞增多，分泌大量细胞因子和生长因子，使斑块变得不稳定。此外炎症反应会导致斑块破裂，释放大量的脂质和炎症介质，形成血栓；血栓进一步阻塞动脉，可能导致急性心脑血管事件。VCAM-1、Gal-3高表达会促进机体炎症反应，加速冠心病病情进展，增加不良预后的发生风险；具有抑制炎症活性的miR-145、SFRP5高表达有助于降低机体的炎症反应，对冠心病具有保护作用，其表达水平偏低会增加不良预后的发生风险。进一步分析显示，血清VCAM-1、miR-145、Gal-3、SFRP5水平联合检测对冠心病患者预后具有较高的预测价值，可作为参考指标用于冠心病患者治疗方案的制定，改善预后水平。

综上所述，冠心病患者血清VCAM-1、Gal-3水平明显升高，miR-145、SFRP5水平明显降低，且与冠心病分类、冠脉病变支数密切相关，联合检测对冠心病患者预后具有较高的预测价值。

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[10]王宏刚,杨光,姜乐.Galectin-3抑制剂通过降低Gal-3的表达和心肌纤维化改善大鼠缺血性心力衰竭的机制研究[J].临床和实验医学杂志,2021,20(15):1578-1582.

[12]杜聪慧,边春云,郝雁.急性ST段抬高型心肌梗死患者经皮冠脉介入术后血清分泌型卷曲相关蛋白5水平与早期心功能恢复的关系[J].中国分子心脏病学杂志,2021,21(6):4287-4291.

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基金资助:上海市科学技术委员会科技支撑项目(12401904800);上海市卫生健康委员会科研项目(2021CX031);

文章来源:陈鑫,张阿莲.冠心病患者血清VCAM-1､miR-145､Gal-3､SFRP5水平变化[J].北华大学学报(自然科学版),2024,25(05):620-625.