急性呼吸道感染是最常见的呼吸系统疾病之一，发病率居急性传染病之首。婴幼儿免疫力较差，通常更易患急性呼吸道感染[1]。在发展中国家，呼吸道疾病感染病死率占儿童死亡的30%以上[2]。急性呼吸道感染通常由细菌、病毒等引起。近年来，由于抗生素的有效利用，细菌引起的儿童呼吸道感染也有所下降，但细菌以外的病原体(如病毒等)引起的呼吸道感染形势依然尤为严峻[3]。95%的急性上呼吸道疾病和大部分的下呼吸道疾病是由细菌外的病原体引起的，如病毒、支原体及衣原体等[4],其中80%由呼吸道病毒感染引起[5]。儿童呼吸道感染病原体最常见的原因为病毒和支原体感染。及早诊断病原体对呼吸道感染疾病的了解和治疗具有极为重要的作用。呼吸道病原体的分离是病原体检测的金标准，但周期长、环节多、要求高，不适合临床开展。此外，目前对病原体分离培养和鉴定在技术上具有较大的困难，我国很多地区缺乏对于多种病原体病原学的可靠监控资料[6]。近年来，核酸检测以其快速、简便、高通量、高灵敏度及高特异度的优势成为诊断呼吸道病原体感染的主要方法。本研究探讨泰安地区呼吸道感染疾病的诊断和流行情况。

1、资料与方法

1.1 资料来源

选取2019年1月—2021年12月在泰安市妇幼保健院就诊的呼吸道感染疾病(咳嗽、咽痛、发热及喘憋等)患儿9 332例为研究对象，年龄2个月～12岁，其中男患儿5 394例，女患儿3 938例。本研究已取得患儿家属知情同意，并通过医学伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 仪器和试剂

检测试剂厂家为宁波海尔施基因科技有限公司研发的13种呼吸道病原体多重检测试剂盒(PCR毛细电泳片段分析法),设备为ABI-3500DX测序仪和ABI-Veriti扩增仪。

1.2.2 标本采集和检测方法

对具有呼吸道症状的患儿，取咽拭子样本，进行13种呼吸道病原体核酸检测，取样本提取基因组DNA,经扩增后，采用毛细管电泳分离不同长度的扩增产物，得到病原体的检测结果，发放病原体核酸定性报告。研究中检测的13种呼吸道病原体分别为肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(Ch)、呼吸道合胞病毒(HRSV:A组、B组)、甲型流感病毒(InfA:H7N9、H5N2)、甲型流感H1N1型病毒、甲型流感H3N2型病毒、腺病毒(HADV)、博卡病毒(Boca)、偏肺病毒(HMPV)、副流感病毒(HPIV:1-4型)、乙型流感病毒(InfB)、鼻病毒(HRV)及冠状病毒(HCOV:229E、OC43、NL63、HKU1)。

1.2.3 分析检测报告内容

分析13种呼吸道病原体在多个年龄段(0～1岁、>1～2岁、>2～3岁、>3～4岁、>4～5岁、>5～6岁及>6～12岁)分布情况；分析13种呼吸道病原体感染的季节特征；分析13种呼吸道病原体的阳性率。

1.3 统计学分析

运用SPSS 19.0 软件对进行统计学分析，计数资料以百分率(%)表示，数据组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1 患儿性别分布情况

对9 332例患儿的性别进行统计分析，发现2019—2021年男性患儿比例高于女性患儿，差异有统计学意义(χ2=221.71,P<0.05)。见表1。

2.2 患儿年龄分布情况

对2019-2021年的患儿0～6岁、>6岁患儿阳性率进行统计，发现0～1、>1～2及>3～4岁儿童阳性率较高，阳性率分别为25.00%、19.61%及16.38%,0～1岁患儿阳性率最高。>2～3、>4～5及> 6岁儿童阳性率分别达到12.39%、10.24%及10.82%。>5～6岁儿童阳性率最低，仅为5.55%。2019—2021年0～1岁年龄段患儿总阳性率与>6～12岁患儿比较，差异有统计学意义(χ2=95.12,P<0.05)。此外，2019年、2020年及2021年0～1岁年龄段患儿阳性率与>6～12岁年龄段比较，差异均有统计学意义(2021年χ2 = 19.24,2020年χ2=22.50,2019年χ2 = 46.14,均P<0.05)。见表2。

表1 2019—2021年呼吸道感染疾病患儿性别分布情况

表2 2019—2021年呼吸道感染疾病患儿年龄分布情况

2.3 13种呼吸道病原体阳性检出率

对患儿13种呼吸道病原体阳性检出率进行统计分析，检出率包括单一阳性和混合阳性。9 332例患儿中，13种呼吸道病原体检测阳性总数为5 395例(57.81%),其中单一阳性比例为27.65%。每年阳性率与病原体检出率均有不同。2021年阳性检出率为59.21%(1 945/3 285),其中单一阳性率为25.42%;2020年阳性率为50.21%(1 072/2 135),其中单一阳性率为25.57%;2019年阳性率60.79%(2 378/3 912),其中单一阳性率为30.65%。见表3。

表3 2019-2021年13种呼吸道病原体阳性检出率分析

每种病原体的阳性检出率各不相同。9 332例患儿中，鼻病毒阳性检出率最高，达到20.31%;其次为呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒及肺炎支原体，其阳性检出率分别为20.31%、11.85%、8.33%及4.98%;其余8种病原体阳性率较低，在0.10～4.00%之间，肺炎衣原体阳性率最低，仅为0.18%。每年的流行病原体并不完全相同，2021年流行病原体为鼻病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒及偏肺病毒；2020年流行鼻病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒及腺病毒；2019年流行的病原体类型比较多，阳性率达到5%以上的有鼻病毒、腺病毒、副流感病毒、合胞病毒及甲型流感病毒。其中，肺炎支原体在2021年发病率明显升高，达到了9.50%;呼吸道合胞病毒在2020年和2021年较2019年明显升高；腺病毒在2020年和2021年发病率明显降低。鼻病毒和副流感病毒3年发病率均较高，且比较平稳，3年发病率范围分别为20%左右和8%左右。此外，甲型流感H1N1型病毒和甲型流感H3N2型病毒在2020年和2021年阳性率明显低于2019年。核酸检测阳性结果见表4。

2.4 13种呼吸道病原体季节分布情况

2021年肺炎支原体阳性率明显升高，其在冬季阳性率达到25.08%,与同期2019年阳性率(1.44%)比较，差异有统计学意义(χ2=6.66,P<0.05)。鼻病毒阳性率在3年内最高为20.75%,尤其是夏、秋及冬季节最为明显，分别达到了20.80%、26.43%及20.72%,秋季最高发。呼吸道合胞病毒在春、冬两季阳性率分别为19.74%和20.66%,明显高于夏(0.64%)、秋(3.30%)两季。副流感病毒在夏、秋两季阳性率较高，分别为11.90%和9.80%。腺病毒季节变化与年份相关，2019年夏季阳性最高(18.73%),而在2020年夏季阳性率极低(0.88%)。2020年和2021年腺病毒春冬阳性率高于夏秋。2019—2021年13种呼吸道病原体季节分布情况见表5。

表4 2019—2021年13种呼吸道病原体核酸检测阳性结果分布情况[例(%)]

表5 2019—2021年13种呼吸道病原体季节分布情况(%)

3、讨论

呼吸道感染是临床最常见的疾病之一，全球每年约有150万儿童因呼吸道感染而死亡[7]。呼吸道感染病原体较多，包括病毒、细菌及非典型微生物等。由于引起急性呼吸道感染的病原体种类繁多、传播快、感染力强，且同一种病原体可能会引起多种临床症状，不同的病原体也可引起相似的临床症状，针对不同病原体的治疗方案有所不同，因此要求实验室能够对呼吸道病原体进行快速检测和早期鉴别，以协助临床对呼吸道感染进行早期防控和治疗，能有效避免抗生素滥用[8]。病毒是呼吸道感染最主要的病原体，2岁以下儿童由病毒感染引起的呼吸道感染疾病占80%～90%[7]。病毒与支原体、衣原体一样均难以培养，而免疫学检测具有抗原检测灵敏度低、抗体检测窗口期的缺点，因此，分子生物学检测技术成为检测病毒的首选手段，从而为临床提供更准确的诊断信息。

本研究从泰安市妇幼保健院收集具有呼吸道感染症状的患儿9 332例，对其进行13种病原体核酸检测。从性别分布看，男童病原体感染率明显高于女童，因未对各种病原体感染患儿进行性别统计，结论有待进一步论证。从年龄段分布来看，0～1岁儿童病原体检出率最高，其次为>1～2岁组和>3～4岁组，>5～6岁组检出率最低，该结果与邱莉等[7]在河源市妇幼保健院的统计结果相符，呼吸道病原体的检出率会随着儿童年龄的增长而降低。这些结果均表明年龄较低的儿童(0～2岁)可能是呼吸道感染的高发人群，其原因可能与低年龄组母源抗体逐渐消失，其机体免疫力相对较弱有关。此外，婴幼儿免疫系统发育并不完全，免疫功能相对来说较差，导致其对抗感染的能力降低。>3～4岁组为上幼儿园的年龄段，患儿各器官功能也逐渐发育成熟，对病原体易感性有所下降。但3～4岁依旧为呼吸道疾病的高发年龄段，其检出率也相对较高，因此对高发年龄段儿童要进行格外防护。

本研究中核酸阳性患儿包括单一感染和混合感染，故阳性率较高。有资料[9]显示，儿童呼吸道病毒的混合感染率为1%～40%,张思潮等[10]研究显示病毒感染总阳性检出率为41.90%。本研究中患儿阳性率较高，3年均达到50%以上，可能与检测呼吸道病原体种类多有关，尤其是鼻病毒、腺病毒及呼吸道合胞病毒等提高了阳性率。本研究结果显示，阳性检出率最高的病原体分别为鼻病毒(20.31%)、呼吸道合胞病毒(11.85%)、副流感病毒(8.33%)、腺病毒(7.46%)及肺炎支原体(4.97%),表明这5种病原体是泰安地区儿童呼吸道病原体感染的主要病原体。这些病原体类型在其他研究中也被证明是主要的感染类型[7,11],但不同的研究中每种病原体的阳性率不尽相同。王欣等[11]研究表明，孝感地区呼吸道合胞病原体阳性率为12.6%,与本研究结果相似。有研究[12]表明，鼻病毒在呼吸道感染病原体中发病率最高，与本研究结果相同，但该研究中鼻病毒的发病率达到15.4%,与本研究差异较大。张思潮等[10]在浙江省湖州市的统计结果显示，呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒及人腺病毒的阳性率最高，分别为8.98%、7.60%及5.94%。本研究中甲型流感病毒的阳性率仅为3.45%。这些结果的差异可能是地域等原因造成的，在不同区域，占主导地位的病原体类型可能不同。

本研究还统计了2019—2021年每种病原体各个季节的阳性率。2021年肺炎支原体阳性率明显升高，其在冬季阳性率达到25.08%,是2021年冬季最主要的传染源。鼻病毒阳性率在各季节检出率均较高，其中以秋季为最高(26.43%)。呼吸道合胞病毒在春、冬两季阳性率分别为19.74%和20.66%,明显高于夏(0.64%)、秋(3.30%)两季。副流感病毒在夏、秋两季阳性率较高，分别为11.90%和9.80%。腺病毒季节变化似乎并无明显的规律，2019年腺病毒夏季阳性率最高(18.73%),但在2020年腺病毒夏季阳性率极低(0.88%)。另外，本研究中2021年腺病毒春冬季阳性率高于夏秋季。

有研究[13]表明，约90%的儿童在2岁前感染过呼吸道合胞病毒，其中约40%为下呼吸道感染，甚至有少数引起严重后果。呼吸道合胞病毒季节感染特点为冬季>春季>秋季>夏季[11],且众多国内外研究[11,14]均表明呼吸道合胞病毒具有冬春季流行的特点。本研究中呼吸道合胞病毒在春、冬季节检出率明显高于其余两季，与以往研究相符。腺病毒是一种无包膜的双链DNA病毒，是儿童下呼吸道感染最重要的病原体之一[15]。有文献[16]报道，约18.7%的儿童肺炎是由该病原体引起的。其常见临床表现为高热、咳嗽及喘息，严重时甚至会出现呼吸衰竭的情况，治疗中需要通过呼吸机辅助通气治疗[17]。有报道[18]显示，腺病毒感染多见于5岁以下儿童，且在0～5岁儿童中感染率随年龄增大而升高。孙惠泉[19]在苏州地区进行的流行病学分析表明，2006—2015年腺病毒感染率为1.24%,且其阳性检出率随着年龄的增大而升高。儿童腺病毒感染具有明显的季节分布特点，不同地区、不同气候条件下季节分布各有差异。北方以冬春季节感染率相对较高，南方则以春夏季为感染高峰。北京地区和山东青岛地区[20]的报道显示，冬、春季节为儿童呼吸道腺病毒感染的高发季节，而湖南长沙地区研究表明腺病毒感染的高发季为夏季。本研究中腺病毒感染季节特征每年不尽相同，如2019年为夏季高发，与邱莉等[7]在广东河源地区的研究、饶睿等[2]在四川乐山地区的研究及孙惠泉等[19]在苏州地区的研究结果一致。而2020年和2021年秋冬季高发。已有研究[21]表明，腺病毒感染与气温、日照及气候因素关系密切，本研究中出现的季节差异可能是由气候特征的变化引起的，但具体原因仍需要进行进一步调查。副流感病毒与腺病毒一致，其阳性率在夏秋季高于夏秋两季。与柳晓琴等[22]研究结果相似。儿童感染鼻病毒可出现发热、咳嗽及喘息等症状，导致支气管肺炎和毛细支气管肺炎。鼻病毒不仅可引起急性上呼吸道感染，在下呼吸道感染患儿中也是有较高的感染率，在伴有其他疾病导致抵抗力低下时易于并发呼吸道鼻病毒感染。婴幼儿，尤其是1岁以下的婴儿是鼻病毒的易感人群。目前研究[23,24]主要认为，鼻病毒感染存在于各年龄组且全年均可发生。随着患儿年龄的增长，鼻病毒阳性检出率逐渐降低。Zeng等[25]报道鼻病毒高发时段为9～11月。本研究中鼻病毒在全年各季节检出率均较高，以秋季最高。

综上所述，通过对泰安地区9 332例0～12岁的儿童13种呼吸道病原体进行核酸检测，了解到0～2岁儿童最易受呼吸道病原体感染，且随着年龄增长，病原体检出率出现下降趋势。2019—2021年最流行的5种病原体分别为鼻病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、腺病毒及肺炎支原体。各种病原体的易感性随季节变化较大，鼻病毒在各个季节发病率均较高，以秋季为最高，呼吸道合胞病毒在春、冬季发病率较高，腺病毒和副流感病毒在夏季发病率最高。对呼吸道疾病早期诊断和精准治疗具有重要的临床意义，通过流行病学分析，掌握当季流行病原体，有利于疾病预防。

参考文献:

[1]祁春茹,周向红,张振兴,等.呼吸道感染性疾病患儿3 192例EB病毒血清学和核酸检测结果分析[J].中国药物与临床,2019,19(7):1054-1056.

[2]饶睿,李松,魏琼,等,2016-2020年乐山市某院急性呼吸道腺病毒感染儿童的分子流行特征[J].中华医院感染学杂志,2021,31(23):3657-3661.

[4]刘胜男,侯铁英,廖建枫,等.广州地区2 460例呼吸道感染患者7种呼吸道病原体RNA检测结果分析[J].中国实验诊断学,2021,25(1):1-4.

[6]张莉,马琳,安会波,等.2017-2018年石家庄地区急性呼吸道感染儿童呼吸道合胞病毒的监测[J].河北医药,2019,41(11):1742-1745.

[7]邱莉,廖翠芳,林兴旺,等.5 530例儿童7项呼吸道病毒检测结果分析[J].广东医科大学学报,2021,39(2):157-160.

[8]秦笙,刘文宽,原铁,等.不同方法检测急性呼吸道感染患儿咽拭子与鼻拭子标本诊断呼吸道合胞病毒感染的评价[J].中国当代医药,2016,23(21):118-120.

[10]张思潮,严伟,徐德顺.2016-2019年浙江省湖州市儿童严重急性呼吸道病毒感染流行病学分析[J].疾病监测,2021,36(2):137-141.

[11]王欣,虞典元,胡小平,等.2017-2019年孝感市儿童呼吸道病毒感染流行病学特征[J].实用预防医学,2021,28(9):1071-1075.

[12]赵林清,钱渊,朱汝南,等.北京地区2002-2006年急性呼吸道感染儿童中鼻病毒感染的研究[J].中华流行病学杂志,2007,28(7):683-685.

[13]王颖硕.儿童呼吸道病毒感染的流行病学特点[J].中国实用儿科杂志,2019,34(2):100-104.

[14]杨慧,袁伯稳.6 810例儿童呼吸道感染病毒病原学回顾性分析[J].公共卫生与预防医学,2021,32(1):109-112.

[15]李亚敏,刘高山,周为民,等.上海市重症急性呼吸道感染儿童中可检出多种型别的人腺病毒[J].中华实验和临床病毒学杂志,2016,30(1):10-13.

[18]姚娟,沈国松,范丽红,等.6 089例住院儿童呼吸道感染常见病毒病原学检测分析[J].中华流行病学杂志,2015,36(6):664-666.

[19]孙惠泉,张新星,顾文婧,等.2006-2015年苏州地区440例儿童呼吸道腺病毒感染的流行病学分析[J].中国当代儿科杂志,2017,19(1):34-38.

基金资助:山东省泰安市科技创新发展项目(政策引导类)(2020NS233);

文章来源:王涛,刘建生,刘艺等.泰安地区儿童呼吸道感染病原体分布情况[J].中国妇幼保健,2023,38(22):4367-4371.