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12岁以下儿童肺炎支原体感染后分类抗体变化趋势分析
摘要： 摘要：目的 探讨12岁以下儿童肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染后体内IgM和IgG抗体变化趋势，为临床诊治该病提供科学依据。方法 选择2017年1月至2019年12月某医院就诊的MP感染患儿240例，其中肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia, MPP)100例和难治性肺炎支原体肺炎(refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia, RMPP)140例，根据年龄分为0～<3岁组、3～<6岁组、6～<9岁组、9～<12岁组，动态检测MP感染患儿不同时间的体内IgM和IgG抗体水平。结果 0～7d IgM和IgG的抗体阳性率分别为65.2%和50.5%,8～15d IgM抗体阳性率高达100.0%,IgG抗体阳性率为85.2%,16～30d IgM抗体阳性率逐渐降低，IgG抗体阳性率高达100.0%,随后抗体阳性率开始逐渐降低，维持在80.0%;MPP和RMPP组30d内IgM和IgG抗体水平逐渐升高，30d后开始下降，RMPP患儿30d内IgM抗体水平低，而RMPP患儿在发病31～180d的IgG抗体水平较MPP患儿更高，差异有统计学意义(Z=3.324、3.422、2.876,P<0.001);与其他年龄组(0～<3岁组和9～<12岁组)相比，学龄前期儿童和学龄期儿童IgM抗体水平最低，发病31～180d,学龄前期儿童和学龄期儿童IgG抗体水平明显高于其他年龄组，差异有统计学意义(Z=3.021、2.211、2.569,P<0.001)。结论 MP感染的特异性IgM和IgG抗体水平随时间变化呈先上升后下降趋势，RMPP患儿特异性IgG抗体更明显，尤其是学龄前期儿童和学龄期儿童。
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肺炎支原体(MP)感染是儿童社区获得性肺炎(community acquired pneumonia, CAP)最重要病原体之一，占CAP患儿的10%～40%,四季均可发病，常发生在学龄前期和学龄期儿童中，潜伏期为1～3周，临床症状主要为发热和咳嗽，可从无症状的呼吸道感染到严重的肺部炎症，甚至出现呼吸困难和肺部实变体征[1,2]。血清MP抗体检测是诊断感染MP的金标准，包括IgG、IgM和IgA抗体，明确不同类型抗体动态变化趋势，可掌握MP感染的时间(新近感染和既往感染)和感染次数(首次感染和再次感染),有利于指导临床抗生素用药，降低MP耐药性的产生[3]。然而，目前对于MP感染后体内血清学特异性抗体规律性变化尚不清楚。因此，本研究的目的是探讨12岁以下儿童MP感染后分类抗体(MP-IgM和MP-IgG)动态变化趋势分析，以期探讨MP患儿特异性抗体出现规律，为临床治疗提供重要的依据。
1、对象与方法
1.1 研究对象
选择2017年1月至2019年12月某医院就诊MP感染的患儿240例进行前瞻性研究，诊断符合临床关于儿童MP诊治专家共识诊断标准[4],出现近期或急性感染症状(如发热、咳嗽、气促、呼吸困难等),单次测得MP抗体滴度≥1∶160,急性期和恢复期MP抗体滴度呈3倍或4倍以上升高或降低为MP感染。纳入标准：年龄<12岁的MP感染患儿；配合动态检测抗体的患儿。排除标准：近3个月内再次感染MP患儿；存在其他病原体混合感染者(如病毒或细菌感染者);不配合抗体检测的患儿。患儿均动态检测MP特异性IgM和IgG抗体4次(0～7d、8～15d、16～30d、31～60d、61～90d和91～180d),共抽血6次，随访时间为6个月。收集所有患儿年龄、性别、入院病程、白细胞(white blood cell, WBC)计数、C反应蛋白(C-reaction protein, CRP)和降钙素原(procalcitonin, PCT)等一般临床资料。患儿家属均签署知情同意书，该项研究通过本院伦理委员会批准(伦理号：佛医伦审E610241)。
1.2 方法
所有患儿入院当天均进行MP特异性IgM和IgG抗体检测，并于不同病程(0～7d、8～15d、16～30d、31～60d、61～90d和91～180d)进行检测分析，采取MP患儿血清和咽拭子标本，采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)对血清MP-IgM和MP-IgG抗体检测，应用iFLASH-3000I全自动化学发光仪检测，严格按照日本富士MP抗体检测试剂盒的操作步骤进行。
1.3 分组与观察指标
根据临床症状分为肺炎支原体肺炎(MPP)和难治性肺炎支原体肺炎(RMPP),即MP感染经大环内酯类抗菌药连续治疗7d及以上，出现临床症状加重、持续性发热且肺部影像学特征加重，其中MPP组100例，RMPP组140例；根据年龄分为0～<3岁组(婴儿期),3～<6岁组(幼儿期或学龄前期),6～<9岁组(学龄期),9～<12岁组(儿童期),每组分别为46、80、74和40例。
1.4 统计学分析
采用SPSS 21.0软件进行数据分析，计量资料采用均数±标准差表示，两组间的比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，非正态的计量资料采用中位数和四分位间距M(P25,P75)表示，组间比较采用Mann-Whitney U检验，用Z表示统计结果；计数资料采用频数百分比(%)表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。检验水准α=0.05。
2、结 果
2.1 不同临床症状的MP感染患儿的一般临床资料分析
与RMPP组比较，MPP组WBC计数、CRP和PCT水平明显升高，差异有统计学意义(t/χ2/Z=-15.691、-12.161、-12.614,P<0.05),在年龄、性别、入院病程等一般临床资料比较差异无统计学意义(t/χ2/Z=-1.059、0.965、0.564,P>0.05),见表1。
表1 MPP组和RMPP组患儿一般临床资料比较
2.2 不同病程MP感染患儿特异性IgM和IgG抗体阳性率分析
在发病0～7d IgM和IgG的抗体阳性率分别为65.2%和50.5%,随着病情进展，抗体阳性率逐渐上升，8～15d IgM抗体阳性率高达100.0%,IgG抗体阳性率为85.2%,在16～30d IgM抗体阳性率逐渐降低，IgG抗体阳性率高达100.0%,31～60d IgM和IgG抗体阳性率开始逐渐降低，在61～90d和91～180d IgG和IgM抗体阳性率均维持在80.0%左右，IgM较IgG抗体阳性率达峰时间约早1周，见图1。
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图1 不同病程MP感染患儿特异性IgM 和IgG抗体阳性率分析
2.3 不同临床症状MP感染患儿不同时间IgG和IgM抗体水平分析
MPP和RMPP组在30d内IgM和IgG抗体水平逐渐升高，30d后开始下降，RMPP患儿30d内IgM水平低，而RMPP患儿在发病31～60d、61～90d和91～180d的IgG抗体水平较MPP患儿更高，差异有统计学意义(Z=3.324、3.422、2.876,P<0.001),见表2。
2.4 不同年龄组MP感染患儿不同时间IgM和IgG抗体水平分析
不同年龄组MP感染患儿在30d内，IgM和IgG抗体逐渐升高，30d后逐渐下降，与其他年龄组(0～<3岁组和9～<12岁组)相比，学龄前期儿童和学龄期儿童IgM抗体水平最低，在发病31～60d、61～90d和91～180d, 学龄前期儿童和学龄期儿童IgG抗体水平明显高于其他年龄组，差异有统计学意义(Z=3.021、2.211、2.569,P<0.001),见表3。
表2不同临床症状MP感染患儿不同时间IgG和IgM抗体水平的变化[M(P_(25),P_(75))]
表3不同年龄组MP感染患儿不同时间IgG和IgM抗体水平的变化[M(P_(25),P_(75))]
3、讨 论
MP是引起儿童CAP的主要病原菌，能引起宿主细胞损害，诱导单核细胞、浆细胞和淋巴细胞浸润，导致患儿体液免疫功能和细胞免疫功能损伤，以往研究表明，各种特异性和非特异性免疫球蛋白和补体成分参与MP感染，促进机体免疫功能恢复[5,6],而选择特异性和灵敏性高的实验室诊断技术判断MP感染趋势，从而进行适当的抗生素治疗，可减少药物滥用和耐药率[4,7]。MP感染患儿由于免疫系统低下，临床症状尚不典型，研究报道MP感染患儿血清学MP-IgM和MP-IgG抗体水平呈动态变化，需依靠分离培养和血清学检测诊断[3,8]。分离培养存在周期长、取材风险大、灵敏性低等缺点，由于病原体诱导的免疫反应导致产生抗体，血清学检测是检测MP感染的主要诊断工具[4,7]。血清学检查包含非特异性抗体和特异性抗体检测，血清冷凝集试验是非特异性抗体检测方法，其灵敏度和特异度较低，而特异性抗体主要是检测MP-IgM和MP-IgG抗体，主要采用ELISA法进行血清MP抗体滴度检测，有灵敏度和特异性高、操作简便等优势。本研究通过分析12岁以下儿童MP感染后分类抗体(IgM和IgG)变化趋势，为今后指导MP感染患儿的临床治疗提供重要的诊断及治疗价值。
抗体阳性率对MP感染的病情判断有重要性，李秀娟等报道CAP患儿的IgM和IgG抗体总阳性率为30.0%,且随年龄增长，抗体阳性率呈升高趋势[9]。有学者研究显示，发病患儿不同年龄组与MP感染IgM和IgG抗体阳性率呈正相关，年龄≤1岁、>1～3岁、>3～6岁，>6岁MP感染患儿IgM和IgG抗体阳性率分别为5.6%、20.2%、42.4%和57.3%[10]。本研究表明，初诊(7d左右)患儿IgM和IgG抗体阳性率分别为65.2%和50.5%,随着病程发展，抗体阳性率增加，IgM抗体峰值出现在8～15d, 阳性率为100.0%,IgG抗体在16～30d阳性率达100.0%,此后抗体水平下降，可见动态监测MP感染的变化可反应MP感染引起的IgM和IgG抗体水平变化趋势。既往研究显示，在MP感染急性期和恢复期，血清中IgG和IgM等免疫复合物含量明显升高，重症患者尤其明显[11,12]。MP感染机体后，正常儿童的IgM抗体水平明显升高，通常发生在感染后的7～14d, 3～4周达到峰值，并持续数月[13]。另外，肺炎支原体感染可引起血清总IgE水平升高，诱导IgE介导的气道炎症和气道高反应性，同时可诱导哮喘的即时反应和延迟期反应或双期反应[14]。
IgM抗体检测是急性感染的标志，有早期防御作用，首次感染MP的患儿1周左右可检测出IgM抗体，4周左右可能到达顶峰后水平逐渐降低，持续时间短，IgG在IgM抗体后出现，主要是MP感染的后期出现，1个月左右达高峰，且可在体内持续存在，可获得长久免疫功能[2,4,15]。研究提示机体初次感染的MP患儿1周内MP-IgM滴度高，对于再次感染的MP患儿MP-IgG抗体首度升高，MP-IgM抗体水平上升幅度较低，与既往报道MP抗体水平动态变化规律一致[16,17,18]。本研究中，根据不同临床症状分级，发现MP感染患儿1个月内IgM和IgG抗体水平逐渐升高，随后开始下降，且MPP患儿IgG下降更为明显，提示MP感染患儿动态监测IgG水平，有助于病情严重度的判断。
既往研究提示RMPP患儿较MPP患儿有高水平的IgG抗体[16,17],本研究提示RMPP患儿在发病1个月后IgG抗体水较MPP患儿高，临床症状更为严重的MP感染患儿机体的长期免疫更为显著和强烈，持续性高水平的IgG抗体提示病情更为严重，然而，一些患者MP感染的IgM抗体水平不足，无法在急性感染或再感染的早期检测到，而一些患者在MP感染后数月仍可检测到肺炎支原体IgM抗体水平，这两种情况都会导致临床诊断的困难[18,19],提示IgM抗体诊断MP感染患儿并不具有特异性。
在MP感染患儿中发现不同年龄组患儿随病程发展，30d内IgM和IgG抗体水平逐渐升高，之后逐渐降低，发现学龄前期儿童(3～<6岁)和学龄期儿童(6～<9岁)30d内IgM抗体呈低水平，可能与MP易感染学龄前期儿童和学龄期儿童有关，另外，30d后与其他年龄组比较，学龄前期儿童和学龄期儿童IgG抗体水平明显，既往研究提示不同年龄组存在体液免疫功能差异[20]。结合本研究结果考虑学龄前期儿童和学龄期儿童免疫功尚不完善，MP感染后可能存在体液免疫功能紊乱引起IgM抗体水平低，而后期IgG抗体水平明显升高。
综上，MP感染患儿随着不同时间点发展，存在特异性IgM和IgG抗体水平呈先上升后下降趋势，16～30d内达到高峰，RMPP患儿30d后特异性IgG抗体水平更明显，可判断病情严重程度，且随年龄升高特异性抗体呈动态变化趋势，学龄前期儿童和学龄期儿童IgG抗体水平更为明显。今后需进一步扩大样本检测IgM和IgG抗体水平在MP感染患儿的动态变化趋势，为进一步指导临床诊治MP感染患儿提供重要的参考依据。
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基金资助:2022年度广东省基础与应用基础研究基金企业联合基金(公共卫生与医药健康领域)项目(2022A1515220156);2019年佛山市自筹经费类科技计划项目(1920001000367);
文章来源:卓雪芽,庄健海,张间霞等.12岁以下儿童肺炎支原体感染后分类抗体变化趋势分析[J].医学动物防制,2024,40(02):117-121.
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