首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 内科论文 > 心血管内科论文 > GAS5和PTEN在老年高血压患者血清中的表达及与内皮功能的关系

GAS5和PTEN在老年高血压患者血清中的表达及与内皮功能的关系

2020-09-01 194 上传者：管理员

摘要：目的：通过检测老年高血压患者血清中长链非编码RNA生长特异抑制物5和人类第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因蛋白表达水平,分析二者与内皮功能的关系。方法：选择2018年5月—2019年5月金华市中心医院收治的老年高血压患者87例,另选择同期体检健康者87例作为对照组。实时荧光定量(qRT-PCR)法检测lncRNAGAS5表达水平,ELISA法检测PTEN蛋白表达水平。使用电子血压计测定收缩压(SBP)和舒张压(DBP),使用超声诊断仪检测内皮依赖性血管扩张率(FMD),分析GAS5、PTEN水平与以上指标相关性。结果：老年高血压患者收缩压、舒张压显著高于对照组(均P<0.05)。老年高血压患者vWF水平显著高于对照组(P<0.05),老年高血压组患者FMD值、NO水平显著低于对照组(均P<0.05)。老年高血压患者血清lncRNAGAS5及PTEN蛋白水平显著低于对照组(均P<0.05)。老年高血压患者血清lncRNAGAS5及PTEN蛋白水平与NO水平呈正相关(r=0.563,P=0.005;r=0.507,P=0.006),与vWF呈负相关(r=-0.457,P=0.004;r=-0.426,P=0.008)。老年高血压患者血清GAS5与PTEN水平呈正相关(r=0.484,P<0.001)。结论：GAS5与PTEN在老年高血压患者血清中表达下调,与患者血管内皮细胞损伤、血管舒张功能降低有关。

关键词：
内皮功能
心脑血管疾病
生长特异抑制物5
老年高血压
加入收藏

老年高血压属于原发性高血压,以体内循环动脉收缩压和舒张压增高为主要临床特征,常伴有心、脑、肾等器官损害或其他并发症。老年高血压是影响老年人心脑血管疾病发生的重要因素,及时防治老年高血压可明显减少心肌梗死等并发症发生[1]。长链非编码RNA是一种长度大于200nt的具有调控功能的RNA分子,能够调控转录、基因表达等多种生物学途径。据报道,lncRNA可抑制血管内皮细胞增殖和迁移,减少肺动脉高压发生可能[2]。YAOQP等[3]研究发现,lncRNA可调节血管平滑肌细胞的增殖和迁移,参与高血压期间的血管重塑。其中lncRNA生长特异抑制物5(growtharrest-specific5,GAS5)与人类组织代谢和胚胎发育密切相关。研究[4]发现,抑制GAS5表达能增加内皮细胞生成血管能力。人类第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因是一种肿瘤抑制因子,能调控细胞周期。研究[5]表明,PTEN在再狭窄和血管增生性疾病中抑制血管平滑肌细胞增殖。闫博阳等[6]研究发现,PTEN在动脉粥样硬化组织中低表达,与血管内皮细胞增殖减少和凋亡增加有关。由于血管内皮细胞和血管平滑肌细胞均与血管内皮功能和高血压进展有关[7],本研究通过检测GAS5和PTEN在老年高血压患者血清中的表达水平,探究二者与血管内皮功能及老年高血压的关系。

1、资料与方法

1.1临床资料

选取2018年5月—2019年5月金华市中心医院收治的老年高血压患者87例作为老年高血压组,男性53例,女性34例;年龄60～76岁,平均(68.36±4.14)岁。纳入标准:①年龄≥60岁;②均符合《中国高血压防治指南》[8],未服治疗药物情况下,血压持续或非同日3次保持在以下水平之一,收缩压≥140mmHg(1mmHg=0.133kPa),舒张压≥90mmHg。排除标准:①先天性心脏病、心率失常患者;②肾、肝脏功能严重不足者;③患有严重精神疾病者。另选取同期在本院体检的健康者87例作为对照组,男性51例,女性36例;年龄60～75岁,平均(67.79±3.84)岁。2组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义(均P>0.05),具有可比性。本研究经金华市中心医院伦理委员会批准,研究对象对本研究知情并签署知情同意书。

1.2主要仪器和试剂

总RNA提取试剂盒(批号:R1200,美国Solarbio公司)、反转录试剂盒(批号:KL266,上海康朗生物科技有限公司)、实时荧光定量(quantitativereal-timePCR,qRT-PCR)试剂盒(批号:DRR820A,日本Takara公司)、ELISA试剂盒(批号:f00001,美国westang公司)、qRT-PCR仪(型号:ABI7500,美国ABI公司)、电子血压计(批号:BA-806,深圳市哈斯福科技有限公司)、超声诊断仪(型号:Philips7500,荷兰飞利浦公司)。

1.3检测方法

1.3.1样本采集

清晨采集空腹时入组患者及健康者外周静脉血5mL。3000r/min(离心半径为8cm),4℃离心15min,取上层血清分装于无菌EP管(1.5mL)中,后于-80℃冰箱保存备用。

1.3.2实时荧光定量(qRT-PCR)检测GAS5表达水平

Trizol法提取总RNA,使用反转录试剂盒反转录,得到cDNA。qRT-PCR反应体系(20μL)如下:SYBR®PremixExTaqⅡ10μL,cDNA2μL,ROXDye0.4μL,上下游引物(0.4μM)各0.8μL,ddH2O6.0μL。反应步骤如下:①95℃,35s;②95℃,5s;62℃,32s;40个循环。每个样本重复3次,用2-△△CT法计算GAS5表达水平,qRT-PCR所用引物如表1所示。

表1qRT-PCR引物序列

1.3.3酶联免疫吸附(ELISA)法检测蛋白表达水平

采用ELISA法检测血清PTEN、血管性血友病因子(vonWillebrandFactor,vWF)蛋白表达水平、一氧化氮(nitricoxide,NO),严格按照试剂盒说明书要求进行操作。

1.3.4高频超声检测血管内皮依赖性舒张功能

超声诊断仪测量静息时肱动脉基础内径D1和加压放气后舒张期内径D2,血流介导的内皮依赖性血管扩张率(FMD%)=(D2-D1)/D1×100%。

1.3.5其他临床指标测定

使用电子血压计测定收缩压(systolicbloodpressure,SBP)和舒张压(diastolicbloodpressure,DBP)。

1.4统计学方法

用SPSS22.0统计学软件对数据进行分析,计量资料以表示,组间比较采用成组t检验;计数资料用[例(%)]表示,比较采用χ2检验,Pearson法进行相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1一般资料比较

老年高血压组与对照组性别比例、年龄、吸烟、饮酒比例、BMI比较差异无统计学意义(均P>0.05)。老年高血压组患者SBP、DBP值显著高于对照组(均P<0.05),见表2。

2.2血管内皮相关因子比较

老年高血压组患者vWF水平显著高于对照组(P<0.05),NO水平显著低于对照组(P<0.05),见表3。

2.3肱动脉内径变化率比较

如表4所示,静息时老年高血压患者肱动脉基础内径D1和加压放气后舒张期内径D2均高于对照组,老年高血压组FMD值显著低于对照组(均P<0.05),见表4。

2.4血清中lncRNAGAS5、PTEN表达水平比较

老年高血压组患者血清lncRNAGAS5、PTEN蛋白表达水平显著低于对照组(均P<0.05),见表5。

表2老年高血压患者与健康体检者一般资料比较

表3老年高血压患者与健康体检者血管内皮相关因子比较

表4老年高血压患者与健康体检者肱动脉内径变化率比较

表5老年高血压患者与健康体检者血清中lncRNAGAS5、PTEN表达水平比较

2.5老年高血压患者血清中GAS5、PTEN水平与其他因子相关性

老年高血压患者血清lncRNAGAS5、PTEN蛋白水平与NO水平呈正相关(均P<0.05),与vWF呈负相关(均P<0.05),见表6。

表6老年高血压病患者血清中GAS5、PTEN水平与其他因子相关性

2.6老年高血压患者血清中GAS5、PTEN水平相关性

老年高血压患者血清GAS5与PTEN水平呈正相关(r=0.484,P<0.001),见图1。

3、讨论

近年来我国老年高血压患病率呈上升趋势,主要发病因素有遗传、长期精神紧张、饮食结构不合理、动脉硬化、血管内皮功能异常等。老年高血压早期症状有头晕、疲劳、心悸,仅在精神紧张、劳累时发生血压升高。随病情进展,高血压患者血压明显持续升高,可能发生心脑血管并发症[9]。若不及时治疗,患者心、脑、肾等器官出现损害和病变,严重影响患者生活质量。

图1老年高血压患者血清GAS5与PTEN水平相关性

研究[10]显示,血管内皮功能异常能促进动脉粥样硬化、动脉血栓形成,引起心血管疾病。vWF主要存在于血管内皮细胞,当血管内皮功能受损时,血清中vWF浓度增大,是血管内皮功能损伤标志物[11]。NO与血管舒张功能有关,血清NO水平下降预示血管舒张功能降低[12]。此外,FMD值也反应肱动脉血管舒张功能。本研究显示,老年高血压组患者vWF水平显著高于对照组,NO水平显著低于对照组,且老年高血压组FMD值均显著低于对照组,提示老年高血压患者存在血管内皮功能损伤、血管舒张功能降低。

研究[13]证实,lncRNA能调控多种生物学过程,与疾病发生发展有关,可作为疾病诊断、治疗、预后标志物。SHIL等[14]研究发现,lncRNA可促进血管平滑肌细胞增殖和迁移,参与高血压进展。本研究中,lncRNAGAS5在老年高血压患者血清中低表达,与SHIL等[14]的研究结果一致。研究[15]表明,lncRNAGAS5主要在内皮细胞和血管平滑肌细胞中表达,其下调影响内皮细胞活化、增殖,可加重高血压引起的血管功能障碍,提示GAS5表达下调可能通过影响血管内皮功能,影响老年高血压发生。研究[16]发现,PTEN可改善高血压小鼠内皮功能,降低高血压小鼠血压。LIUH等[17]研究报道,肺动脉高压患者的肺动脉平滑肌细胞中PTEN表达低于健康对照组,降低PTEN表达可促进肺动脉平滑肌细胞增殖。本研究中PTEN蛋白在老年高血压患者血清中表达水平下调,与LIUH等[17]的研究结果相似。MATSUOY等[18]研究表明,PTEN可通过下调VEGF表达减少胰腺癌血管生成。下调VEGF可降低老年黄斑病变患者血浆vWF水平,改善患者预后[19]。TAEN等[20]在静脉内皮细胞研究中证实,下调VEGF可抑制内皮细胞NO生成。本研究显示,老年高血压患者血清lncRNAGAS5、PTEN蛋白水平与NO水平呈正相关,与vWF呈负相关。提示GAS5与PTEN可能与高血压患者vWF水平上升和NO水平降低有关,导致老年高血压患者血管内皮功能改变,但具体机制有待进一步研究。另有研究[21]发现,GAS5在子宫内膜癌中低表达,过表达GAS5可显著提高PTEN表达水平,促进癌细胞凋亡。孙玉聪等[4]研究报道,GAS5可能通过PTEN调控内皮细胞功能。本研究显示,老年高血压患者血清GAS5与PTEN水平呈正相关,提示GAS5与PTEN可能存在某种相互作用,共同参与老年高血压进展,但具体机制有待进一步明确。

综上所述,GAS5与PTEN在老年高血压患者血清中低表达,与患者血管内皮细胞损伤、血管舒张功能降低有关,与老年高血压患者血管内皮功能受损有关。但由于本研究样本量较少,二者具体作用机制尚未明确,尚需更多研究证实。

参考文献：

[1]刘福丽,霍小森,刘芳.缬沙坦对老年高血压患者降压效果及对患者TC､TG､LDL-C水平的影响[J].中国老年学杂志,2018,38(15):3627-3629.

[4]孙玉聪,楚海荣,李宏,等.长链非编码RNAGAS5抑制内皮细胞功能[J].中国生物化学与分子生物学报,2018,34(8):905-910.

[6]闫博阳,赵津璋,陈虹.PTEN在动脉粥样硬化中的表达及对血管内皮细胞增殖凋亡的影响研究[J].中国免疫学杂志,2018,34(5):745-750.

[7]吴淼,钟江华,彭振宇,等.原发性高血压患者血清Fractalkine水平与血管内皮功能损伤的相关性研究[J].中国现代医学杂志,2018,28(1):103-107.

[8]中国高血压防治指南修订委员会,高血压联盟(中国)中华医学会心血管病学分会,中国医师协会高血压专业委员会,等.中国高血压防治指南(2018年修订版)[J].中国心血管杂志,2019,24(1):24-56.

[9]裴明和,梁合,孙捷,等.不同外科治疗方案治疗老年高血压脑出血患者的疗效比较[J].中国老年学杂志,2018,38(22):5478-5480.

[10]潘文旭,成小凤,何云,等.入院GRACE评分及血管内皮功能对ACS患者PCI术后中远期预后的预测价值[J].解放军医学杂志,2018,43(12):1031-1038.

[11]邓秋明,陈爱和,尚东,等.肝素影响脓毒性休克血管内皮细胞功能及预后[J].中华急诊医学杂志,2017,26(4):377-380.

[12]周蕾,蔡红芳.穴位埋线辅助治疗原发性高血压及对患者血管内皮功能的影响[J].中国针灸,2018,38(4):349-352.

段军仓,邹楠,王有鹏,王飞.GAS5和PTEN在老年高血压患者血清中的表达及与内皮功能的关系[J].中华全科医学,2020,18(09):1508-1511.