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血浆稀释回归法消除脂肪血标本对凝血结果干扰应用价值研究

2024-10-23 134 上传者：管理员

摘要：目的:探讨血浆稀释回归法消除脂肪血标本对凝血结果干扰的应用价值。方法:选择2021年1月至2023年2月在本院行健康体检的84例正常血浆标本设为对照组，用脂肪乳配制呈不同程度模拟脂肪血，其中轻度脂肪血标本28例，中度脂肪血标本27例，重度脂肪血标本29例。检测患者凝血功能指标，同期选择在本院门诊和住院患者脂肪标本68份设为观察组(重度脂肪血标本31例，中度脂肪血标本37例),行高速离心法、血浆稀释回归法处理，比较不同程度脂肪血血浆稀释回归法与高速离心法处理前、后凝血功能差异。结果:模拟脂肪血中：中、重度脂肪组凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)值高于对照组，D-二聚体(DD)值低于对照组，有统计学差异(P<0.05);轻度脂肪组PT、DD、APTT值与对照组相比，无统计学差异(P>0.05);脂肪血标本中：中度脂肪血标本经血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、APTT值均低于处理前，DD值均高于处理前，有统计学差异(P<0.05);血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、DD、APTT水平比较，无统计学差异(P>0.05)。重度脂肪血标本经血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、APTT值均低于处理前，DD值均高于处理前，有统计学差异(P<0.05);血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、DD、APTT水平比较，无统计学差异(P>0.05)。结论:血浆稀释回归法、高速离心法均可消除中、重脂肪血标本对凝血结果造成的干扰，但前者无需离心操作，操作更简便。

关键词：
凝血功能
凝血活酶
脂肪血标本
血浆稀释回归法
高速离心法
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凝血功能指标主要包含D-二聚体(DD)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)等，其被广泛应用于脂血疾病诊断、血栓性疾病诊断和抗凝、溶栓等方面，为临床诊治提供重要参考[1]。脂血是指血液中的脂肪含量过高，易增加血液黏稠度，影响到血液的流动性，进而影响到凝血功能，而高脂肪血者体内甘油三酯(TG)、胆固醇等浓度升高，会减少纤维蛋白原，导致凝血时间延长，影响凝血检测结果，对临床治疗方案制定造成不良影响[2]。如何有效消除脂肪血标本对凝血结果干扰逐渐受到临床重视。但对脂血标本用常规离心法处理时，血浆浑浊度无法改善，检测结果准确性会受到影响。而高速离心法可避免出现上述问题，但检测费用高昂，受限于中小型医院。本研究分析高速离心法、血浆稀释回归法处理脂肪血标本的效果，信息如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

选择2021年1月至2023年2月本院住院和门诊患者68份脂肪标本设为观察组，年龄24～86岁，平均(53.32±3.16)岁；男性36例，女性32例；按照TG水平分组[3],37例TG为5.57～11.30mmol/L设为中度脂肪组，31例TG>11.30mmol/L设为重度脂肪组。同期选择84例行健康体检者的正常血浆标本设为对照组枸橼酸钠抗凝的血浆外观澄清、无黄疸、无溶血、无脂肪，凝血功能正常，近期未服用任何药物，其中男性44例，女性40例；年龄23～84岁，平均(53.26±3.10)岁。将正常血浆标本用脂肪乳配制成模拟脂肪血，其中轻度脂肪血标本28例，中度脂肪血标本27例，重度脂肪血标本29例。组间各项资料对比，无统计学差异(P>0.05)。存在可比性。研究通过医院伦理委员会审批。

1.2方法

1.2.1凝血功能检测

晨起空腹时，采集受检者枸橼酸钠抗凝血标本5mL,离心10min,转速为3000r/min,取血浆，检测PT、DD、APTT,仪器为全自动血液凝固分析仪(日本积水医疗科技有限公司，CP2000型)。

1.2.2模拟脂肪血标本的配制

用脂肪乳注射液配置脂肪血标本。取84份正常血清标本，1000μL/份，用脂肪乳注射液分别配制成不同程度的脂肪血标本，轻度脂肪血：脂肪乳注射液比例为1%,TG浓度(3.94±2.05)mmol/L;中度脂肪血：脂肪乳注射液比例为2%,TG浓度(8.03±3.13)mmol/L;重度脂肪血：脂肪乳注射液比例为3%,TG浓度(22.70±5.14)mmol/L。

1.2.3血浆稀释回归法

用正常血浆稀释中、重度模拟脂肪血标本，稀释倍数为1～10倍，参照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP7-A2文件操作，检测PT、DD、APTT水平，检测结果经稀释转换公式计算，获取消除脂肪血干扰后的计算值，比较DD、PT、APTT稀释前、后水平是否有差异，并获得DD、PT、APTT的最佳稀释倍数。

1.2.4高速离心法

用高速离心机(Centrifuge5430型，德国艾本德股份公司)对脂肪血标本实施离心操作，转速12000r/min,时间10min。

1.3观察指标

(1)比较模拟不同程度脂肪血组凝血功能指标差异。(2)比较不同程度脂肪血血浆稀释回归法与高速离心法处理前、后凝血功能差异。

1.4统计学方法

应用SPSS21.0软件分析数据计量资料，计数资料以率表示，用x2检验，用表示，多组对比用F检验，两组对比用t检验，P<0.05为有统计学差异。

2、结果

2.1模拟不同程度脂肪血组凝血功能指标对比

中、重度脂肪组PT、APTT值高于对照组，DD值低于对照组，有统计学差异(P<0.05);对照组、轻度脂肪组DD、APTT、PT相比，无统计学差异(P>0.05)。见表1。

表1模拟不同程度脂肪血组凝血功能指标对比

2.2中度脂肪血患者两种方式处理前、后凝血功能指标对比

中度脂肪血标本经血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、APTT值均低于处理前，DD值均高于处理前，有统计学差异(P<0.05);血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、DD、APTT水平比较，无统计学差异(P>0.05)。见表2。

表2中度脂肪血患者两种方式处理前、后凝血功能指标对比

2.3重度脂肪血患者两种方式处理前、后凝血功能指标对比

重度脂肪血标本经血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、APTT值均低于处理前，DD值均高于处理前，有统计学差异(P<0.05);血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、DD、APTT水平比较，无统计学差异(P>0.05)。见表3。

表3重度脂肪血患者两种方式处理前、后凝血功能指标对比

3、讨论

脂血标本典型表现血脂浓度异常升高且外观血浆呈白色/乳白色，极低密度脂蛋白、乳糜颗粒是血脂主要成分，经离心处理后会有大量乳糜成分悬于血浆内，检测准确性受到直接影响[4]。目前，高脂血标本在临床检测中日益增多，多采用血凝分析仪以散射比浊法分析、检测凝血相关项目，但检测数据易受到悬浮于血浆中的乳糜颗粒影响，造成结果偏差，严重干扰临床诊断与治疗[5]。如何有效消除脂血带来的影响具有积极意义。本研究分析显示，模拟脂肪血的中、重度脂肪组DD值低于对照组，PT、APTT值高于对照组；对照组、轻度脂肪组DD、APTT、PT无差异，提示凝血结果受轻度脂肪血干扰小。本研究采用的CP2000血凝分析仪是以光学比浊法为检测原理，以透光度降低判断终点，脂血会导致吸光强度改变，进而透射光和散射光的强度也发生改变，根据凝固过程中浊度的变化来测定凝血功能。而轻度脂肪血标本内TG含量较低，对凝血检测光吸收强度改变较弱，因此对检测结果影响较小。中、重度脂肪血标本内含有较高的TG,加大了吸光强度改变，散射光、透射光强度会受到影响，干扰检测准确性，特别是包裹血浆中凝血因子的重度脂肪血，血浆凝血因子、凝血试剂之间无法充分反应，影响检测结果[6]。

以往临床采用乙醚萃取法、生理盐水稀释法、脂质清除剂法、聚乙二醇法等方式消除脂肪血干扰，其均为被检测物质以外物质，易有基质效应出现，影响临床检测结果，且操作复杂，临床应用受到限制[7]。高速离心法是目前被临床认可的消除脂肪血的有效方式，可信度较高、操作简单，但因其设备昂贵，在基层医院内推广难度较大[8]。本研究分析显示，在脂肪血标本中，中、重度脂肪血标本经血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、APTT值均低于处理前，DD值均高于处理前；血浆稀释回归法、高速离心法处理后PT、DD、APTT水平比较无明显差异，提示两种方式均可消除凝血结果受中、重脂肪血标本的影响。血浆稀释回归法中稀释液取正常血浆标本，不同倍数对不同浓度脂肪血各指标稀释，中、重度脂肪血内各指标最佳稀释倍数分别为3倍、5倍，而APTT、PT为2倍。血浆稀释回归法检测时能防止因其他物质稀释引起的基质效应，且无需离心操作，操作简便、成本低廉，能够满足临床检验的要求。

综上所述，血浆稀释回归法、高速离心法均可消除中、重脂肪血标本对凝血结果造成的干扰，但前者无需离心操作，操作更简便。

参考文献:

[1]荆晶,王文婷,常艳,等.临床凝血功能异常患者血栓弹力图与常规凝血检测的比较及相关性分析[J].中国实验血液学杂志,2020,28(2):629-635.

[2]李寿敏,张茜,赵府,等.严重脂血对Sysmex XE-2100全自动血液分析仪血细胞检测结果的影响[J].现代检验医学杂志,2020,35(2):100-103.

[3]中国成人血脂异常防治指南修订联合委员会.中国成人血脂异常防治指南(2016年修订版)[J].中国循环杂志,2016,31(10):937-950.

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[5]韩笑,王美英.重度脂血标本对临床生化检验结果的影响研究[J].内蒙古医科大学学报,2022,44(1):20-22.

[6]张蕾,张珏.不同方法消除高脂血对临床生化检测项目结果的干扰分析[J].山西医药杂志,2023,52(2):132-135.

[7]郑井滨,张丽,李静旗,等.降低脂肪血浆乳糜程度方法的探讨[J].中国输血杂志,2020,33(4):389-392.

[8]李宜铮,李丽莉,薛云松,等.高速离心法消除脂血对临床常规生化检测项目的干扰分析[J].检验医学与临床,2021,18(17):2481-2483.

基金资助:新余市科技计划项目(编号:20203090815);

文章来源:昌小波,傅丽霞,罗永新.血浆稀释回归法消除脂肪血标本对凝血结果干扰的应用价值研究[J].黑龙江医药,2024,37(05):1073-1075.