首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 内科论文 > 心血管内科论文 > CK-MB、cTNT及miRNA-133诊断急性心肌炎的价值

CK-MB、cTNT及miRNA-133诊断急性心肌炎的价值

2025-07-22 32 上传者：管理员

摘要：目的探讨人外周静脉血肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)及miRNA-133诊断急性心肌炎的价值。方法选取2019年1月至2022年6月在海南省人民医院心内科住院治疗的30例急性心肌炎患者作为研究对象(观察组)，同时选取30例健康人群作为对照组。采用免疫抑制法和电化学发光法分别检测两组受试者外周静脉血的CK-MB及cTnT表达量。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定两组受检者外周静脉血清的miRNA-133表达水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)评估外周静脉血CK-MB、c TNT及miRNA-133水平对急性心肌炎的诊断价值。结果观察组患者外周静脉血的CK-MB、c TNT水平分别为(87.5±16.00) U/L、(1.26±0.56)μg/L，明显高于对照组的(18.4±8.57) U/L、(0.012±0.000 1)μg/L，差异均有统计学意义(P<0.05)；观察组患者外周静脉血清中的miRNA-133表达水平为23.74±1.38，明显高于对照组的16.08±0.29，差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示，外周静脉血清中CK-MB、c TNT及miRNA-133表达水平诊断急性心肌炎患者的AUC分别为0.924、0.942及0.941，特异度分别为90%、98%及95%，敏感度分别为90%、93%及80%，诊断效能均较高。结论人外周静脉血CK-MB、c TNT及miRNA-133诊断急性心肌炎具有一定的临床价值。

关键词：
miRNA-133
心律失常
心肌肌钙蛋白T
急性心肌炎
肌酸激酶同工酶
加入收藏

心肌炎指由各种原因引起的心肌炎性损伤所导致的心脏功能受损,包括收缩､舒张功能降低和心律失常等[1]｡临床上可分为急性心肌炎､慢性活动性心肌炎､慢性心肌炎､慢性炎症性心肌病和心肌炎后心肌病等5类｡急性心肌炎如果未得到有效的控制最终可进展为扩张性心肌病｡临床上大约75%的急性心肌炎患者病程简单,死亡率低,但如出现心衰､心律失常等并发症,院内死亡率将达到12%[2]｡

急性心肌炎患者临床表现多变,目前尚无高敏感性､高特异性的无创诊断方法,当前诊断的金标准是心内膜心肌活检｡心脏磁共振(cardiacmagneticresonanceimaging,CMR)可协助诊断与识别心肌炎[3],但目前国内多家医院尚未开展该项目｡因此,心肌炎的诊断存在一定困难｡心肌损伤标志物的升高有助于急性心肌炎的诊断,目前临床上应用比较多的就是肌酸激酶同工酶(creatinekinaseisoenzyme,CK-MB)和心肌肌钙蛋白(cardiactroponinT,cTNT)｡但Ck-MB受多种因素影响,如感染､肌肉损伤等,而cTNT亦容易受到肾功能不全､心衰､心律失常等原因干扰｡微小RNA(microRNA)是长度为20~24个核苷酸的非编码内源性小核糖核酸,主要通过与其靶信使RNA(messengerRNA,mRNA)的3'非编码区(untranslatedregion,UTR)结合,在转录后水平调节基因表达｡miRNA-133是肌肉特异性的miRNA,在心脏中其特异表达于心肌细胞[4],通过调控靶基因参与心脏发育､心律失常､细胞凋亡､心肌肥厚､心肌纤维化等许多心血管系统的生理及病理过程｡本研究通过检测急性心肌炎患者外周静脉血清中CK-MB､cTNT及miRNA-133的表达水平,探讨CK-MB､cTnT及miRNA-133诊断急性心肌炎的临床价值｡

1、资料与方法

1.1一般资料选取2019年1月至2022年6月在海南省人民医院心内科住院治疗的30例急性心肌炎患者作为观察组｡纳入标准:(1)符合急性心肌炎的诊断标准[5-6];(2)临床资料完整;(3)年龄>18岁｡排除标准:(1)合并精神疾病者;(2)合并肿瘤者;(3)重症感染者;(4)急性心肌梗死者｡观察组中男性23例,女性7例;年龄17~63岁;平均(30.00±5.60)岁;普通心肌炎26例,重症心肌炎3例,狼疮性心肌炎1例｡选取同期在我院进行健康体检的30例健康人群作为对照组｡对照组中男性25例,女性5例;年龄18~60岁;平均(31.24±5.72)岁｡两组受检者的性别和年龄比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性｡本研究经海南省人民医院审核批准(审批号:医伦研[2021]255号),所有受检者均签署知情同意书｡

1.2检查方法

1.2.1CK-MB及cTnT表达检测观察组患者入院后立即采集外周静脉血两管,每管2mL,同时采集对照组人群外周静脉血两管,每管2mL｡CK-MB检测采用免疫抑制法,仪器为雅培C1600,从吸样到出结果为全仪器自动化检测｡cTNT检测采用电化学发光法,仪器为罗氏801,从吸样到出结果为全仪器自动化检测｡

1.2.2miRNA-133表达检测观察组患者入院后立即采集外周静脉血清2mL,同时采集对照组人群外周静脉血清2mL,分别置于EP管中,保存于-80℃冰箱内｡使用TRIpure总RNA提取试剂(ELK生物技术),从血清中提取总RNA,通过紫外分光光度计鉴定RNA提纯液的纯度后,将样本储存于-80℃冰箱中｡采用荧光实时定量PCR试剂盒(EnTurboTMSYBRGreenPCRSuperMix试剂盒)在荧光定量PCR仪器(LifeTechnologies)上进行PCR反应｡miRNA-133特异性正向引物序列为:5'-CCTGGTCCCCTTCAACCAG-3',内参基因U6上游序列为:5'-CTCGCTTCGGCAGCACAT-3'｡反应体系包括cDNA模板15L､无RNA酶水4L和引物1L｡反应条件设定为95℃持续10s,58℃持续30s,72℃持续30s,共进行40个循环,每个样本重复3次｡应用相对定量法对结果进行分析,以2-ΔΔCt法计算血清miRNA-133的相对表达量｡

1.3观察指标(1)比较两组受检者外周静脉血的CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平;(2)分析外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平对急性心肌炎的诊断价值｡

1.4统计学方法应用SPSS23.0统计软件分析数据｡计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,组间比较采用独立样本t检验,计数资料比较采用χ2检验;采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估外周血CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平对急性心肌炎的诊断价值｡以P<0.05为差异有统计学意义｡

2、结果

2.1两组受检者外周静脉血的CK-MB及cTNT表达水平比较观察组患者外周静脉血的CK-MB､cTNT水平明显高于对照组,差异均有显著统计学意义(P<0.05),见表1｡

表1两组受检者外周静脉血的CK-MB及cTNT表达水平比较(x-±s)

2.2两组受检者外周静脉血清的miRNA-133表达水平比较观察组患者外周静脉血清的miRNA-133表达水平为23.74±1.38,明显高于对照组的16.08±0.29,差异有显著统计学意义(t=-4.6266,P=0.0005)｡

2.3外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平对急性心肌炎的诊断价值根据急性心肌炎患者外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133的表达水平绘制ROC曲线,结果显示,外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平诊断急性心肌炎患者的AUC分别为0.924､0.942及0.941,预测特异度分别为90%､98%及95%,灵敏度分别为90%､93%及80%,诊断效能较高,见表2和图1｡

表2外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133表达水平对急性心肌炎的诊断价值

图1外周静脉血CK-MB､cTNTandmiRNA-133表达水平诊断急性心肌炎的ROC曲线

3、讨论

急性心肌炎是一种由多种因素引发的心肌炎症性疾病,其发病机制复杂,临床表现多样,早期诊断和准确预测对于患者的治疗和预后至关重要｡

CK-MB作为心肌细胞内特有的一种酶类物质,在心肌细胞受损时会迅速释放入血,其血清浓度的变化能够较为敏感地反映心肌细胞的损伤程度｡cTNT是心肌特异性的结构蛋白,在心肌损伤后的数小时内便会快速升高并持续一段时间,是临床上诊断心肌损伤的重要标志性指标之一｡本研究观察到,观察组患者CK-MB及cTNT较对照组升高,并且两者之间存在统计学差异,支持CK-MB及cTNT作为诊断急性心肌炎的生物学标志物,外周静脉血清中CK-MB及cTNT诊断急性心肌炎患者的AUC分别为0.924及0.942,预测特异度分别为90%及98%,敏感度分别为90%及93%,诊断效能较高｡然而在临床上它们有时候也存在一定的局限性[7-8]｡例如,CK-MB在骨骼肌损伤､严重感染､脓毒症等其他情况下也可能出现升高,其特异性相对较低;而cTNT虽然特异性较高,但在心肌损伤早期释放量相对较少,可能导致早期诊断的延迟｡因此,联合miRNA-133可能更容易发现急性心肌炎｡

MiRNA-133作为一种在细胞生理过程中发挥关键调控作用的调节性RNA,其重要性不容忽视｡目前被认为其可能与心肌的生理和病理过程密切相关[9],主要参与心肌细胞的炎症､凋亡､增殖及纤维化｡炎症反应作为急性心肌炎的核心病理特征之一,自然受到miRNA-133的严密调控｡当心肌遭受炎症刺激时,多种炎症细胞因子和趋化因子被大量释放,引发局部乃至全身性的炎症级联反应｡而miRNA-133可能通过负反馈调节机制,靶向作用于这些炎症介质的基因表达,抑制其过度合成与分泌,从而有效地减轻心肌组织的炎症程度,避免过度的炎症反应对心肌造成进一步的损伤破坏｡这种机体内在的自我保护机制有助于维持心肌内环境的稳定,为心肌的自我修复创造有利条件[10-11]｡当心肌受到炎症侵袭时,细胞内环境发生剧烈变化,miRNA-133可能通过精准靶向作用于某些促凋亡或抑凋亡相关基因,精细地调控心肌细胞的生死平衡｡它或许能够抑制某些关键的凋亡诱导因子的表达,从而在一定程度上减少心肌细胞因炎症刺激而发生的过度凋亡现象,维持心肌细胞数量的相对稳定,为后续的心肌修复保留一定的细胞基础[12-13]｡由此可见,miRNA-133及急性心肌炎之间似乎存在一定的关系｡

因为miRNA是单链非编码RNA,可调节基因通过降解或抑制目标mRNA来表达,因此它可用作机体体液循环的无创生物标志物[14]｡针对循环中的miRNA,目前有许多研究可以证实它可以作为诊断和治疗的潜在生物标志物｡研究发现,miRNA-133在急性心肌炎患者体内的表达变化更为特异和灵敏,能够在疾病早期阶段就检测到明显的异常表达[15-16]｡这使得miRNA-133有望成为临床上早期诊断急性心肌炎的一个全新且可靠的生物标志物｡本研究发现,外周静脉血清中miRNA-133表达水平确实比健康人群高,并且两组间差异有统计学意义,通过计算ROC曲线,也观察到外周静脉血清中miRNA-133水平对急性心肌炎患者诊断的特异度及灵敏度分别为95%及80%,诊断效能较高,可认为miRNA-133为急性心肌炎的诊断提供一定的价值｡虽然本研究认为外周静脉血CK-MB､cTNT及miRNA-133诊断急性心肌炎具有一定的临床意义,但血清标志物升高只是诊断急性心肌炎其中的一个指标,如需明确诊断,尚需依赖于患者的临床症状､体格检查､心电图､心脏彩超及心脏磁共振,甚至心肌活检等资料进行综合评估｡

尽管本研究取得了一定的成果,但也存在一些局限性｡首先,样本量相对较小,可能会影响结果的稳定性和可靠性｡其次,本研究仅对miRNA-133进行了初步的研究,未对其具体的调控机制进行深入探讨｡未来的研究可以进一步扩大样本量,进行多中心研究,以提高研究结果的可信度｡

参考文献:

[1]中华医学会心血管病分会精准医学学组,中华心血管病杂志编辑委员会成人暴发性心肌炎工作组.成人暴发性心肌炎诊断与之中国专家共识[J].内科急危重症杂志,2017,23(6):443-453.

[6]国家心血管病中心心肌病专科联盟,中国医疗保健国际交流促进会心血管病精准医学分会,陈瑞珍,等.中国成人心肌炎临床诊断与治疗指南2024[J].中国分子心脏病学杂志,2024,24(4):6193-6207.

基金资助:海南省人民医院青年基金项目(编号:QN202005);海南省卫生健康行业科研项目(编号:22A200008);

文章来源:王苗,李斌,董小莉.CK-MB､cTNT及miRNA-133诊断急性心肌炎的价值[J].海南医学,2025,36(14):2057-2060.