首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 内科论文 > 心血管内科论文 > 高同型半胱氨酸血症治疗采用亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C基因多态性检测的价值

高同型半胱氨酸血症治疗采用亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C基因多态性检测的价值

2020-08-31 356 上传者：管理员

摘要：目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C基因多态性检测在高同型半胱氨酸血症治疗中的价值。方法：依据MTHFRA1298C基因检测结果,将2017年2—9月在许昌市中心医院住院的合并HHcy的汉族缺血性脑卒中患者236例分为A(AA型)、B(AC型)、C(CC型)3组,分别有146例(61.86%)、68例(28.81%)和22例(9.32%)患者。3组均在缺血性脑卒中常规治疗基础上给予叶酸片降低Hcy治疗。记录患者应用叶酸治疗前、治疗后3个月、6个月血浆Hcy的变化,计算3组患者治疗6个月时血浆Hcy的下降幅度。结果：A组患者服药后3、6个月血浆Hcy水平分别为(22.21±4.62)μmol/L和(13.63±4.15)μmol/L,显著低于服药前的(27.92±5.24)μmol/L;B、C2组患者服药后6个月血浆Hcy水平分别为(18.58±5.43)μmol/L和(21.05±6.12)μmol/L,显著低于服药前的(29.13±6.82)μmol/L和(31.82±4.48)μmol/L;服药6个月时,A组患者血浆Hcy的下降幅度为(51.39±9.47)%,显著高于B组和C组的(37.42±11.46)%和(34.19±10.53)%。结论：MTHFRA1298C基因多态性显著影响叶酸降低血浆Hcy的治疗效果,检测MTHFRA1298C基因多态性在Hcy治疗中具有一定的指导价值。

关键词：
亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C
基因多态性
心血管内科
高同型半胱氨酸血症
加入收藏

同型半胱氨酸是蛋氨酸去甲基生成的一种含硫氨基酸。现有研究[1]证实,高同型半胱氨酸血症是缺血性心脑血管疾病的重要危险因素之一,对其进行有效地治疗对于预防缺血性心脑血管疾病的发病及其预后均有积极的意义[2,3]。HHcy的诱发因素较多,其中体内叶酸含量不足与MTHFR基因突变最为常见。有研究[4]表明,MTHFRA1298C基因多态性与HHcy之间相关性较强,MTHFRA1298C发生错义突变,碱基C置换A导致编码蛋白质氨基酸序列中谷氨酰胺被丙氨酸替代,导致MTHFR酶活性降低,进而引起血浆Hcy的升高。叶酸是临床上常用的治疗HHcy的药物之一,其降低血浆Hcy的治疗效果是否受MTHFRA1298C基因多态性的影响,目前文献报道较少。本研究通过检测我国中部地区汉族HHcy患者MTHFRA1298C的基因多态性,分析不同MTHFRA1298C基因类型患者应用叶酸降低Hcy治疗的效果,为依据基因多态性检测结果指导HHcy的治疗提供参考。

1、资料与方法

1.1临床资料

将2017年2—9月在许昌市中心医院神经内科住院的250例汉族缺血性脑卒中患者作为研究对象,因患者中途退出、失访等脱落14例,最终共纳入236例患者。患者年龄28～71岁,平均年龄(55.4±12.7)岁,男性132例,女性104例;记录患者年龄、性别、体质量指数、血浆Hcy、合并疾病等临床资料,该研究通过医院伦理委员会的批准并与患者签署知情同意书。完成本研究的236例研究病例,均进行MTHFRA1298C基因检测,其中AA类型例数为146例,占总例数的61.86%,AC类型为68例,占总例数的28.81%,CC类型为22例,占总例数的9.32%。

纳入标准:①缺血性脑卒中患者,经头颅CT或MRI检查证实,其临床诊断符合中华医学会神经病学分会脑血管病学组制定的标准[5];②患者均合并HHcy,血浆Hcy>15μmol/L诊断为HHcy[6]。排除标准:①入院前1个月内曾系统服用叶酸及其他维生素类药物;②严重肝肾功能不全者;③合并恶性肿瘤患者;④妊娠期妇女。

1.2分组和给药

依据MTHFRA1298C基因检测结果,将患者分为A、B、C3组,其中A组患者MTHFRA1298C基因类型为AA型、B组患者MTHFRA1298C基因类型为AC型、C组患者MTHFRA1298C基因类型为CC型。所有患者入组后药物治疗常规应用缺血性脑卒中二级预防常规药物(阿司匹林、他汀类药物等),同时口服给予叶酸片(商品名:常喜,规格:5mg/片,批准文号:国药准字H32023302,生产商家:常州制药厂有限公司)5mg,1次/d,用于降低血浆Hcy治疗。

1.3检测方法

患者入院后次日清晨空腹抽取静脉血约2mL于EDTAK2抗凝管中,采用荧光染色原位杂交技术测定MTHFRA1298C基因多态性。血样用10×NH4Cl预处理液(北京华夏时代基因科技发展有限公司)稀释10倍后处理,3000r/min离心5min,离心半径为57.5mm,制备白细胞悬液,加入MTHFRA1298C基因(rs1801131)耀金分试剂(北京华夏时代基因科技发展有限公司),将样本置入TL998A荧光检测仪(西安天隆科技有限公司生产),其结果由天隆700软件分析和自动判读,给出MTHFRA1298C基因SNP信息。以上步骤严格按试剂盒和检验仪器标准操作规程操作。血浆Hcy测定:应用美康生物科技股份有限公司成产的同型半胱氨酸检测试剂盒(产品编号:H422T2),采用化学发光法检测血浆Hcy浓度。具体操作依据试剂盒的使用说明进行。

1.4观察指标

分别记录3组服用叶酸前和服用叶酸后3、6个月的血浆Hcy检测结果,观察3组患者治疗期间所发生的药品不良反应,重点监测与叶酸相关的药物不良反应。

1.5统计学方法

采用SPSS19.0统计学软件对研究数据进行统计分析。其中计量资料符合正态分布的以x¯±s表示,2组间比较采用成组t检验,多组比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,重复测量资料比较采用重复测量资料方差分析;非正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示,组间比较采用Kruskal-WallisH检验;计数资料以[例(%)]表示,比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.13组基线资料比较

3组性别比例、肝功能、肾功能、合并疾病等基线资料相比较,差异无统计学意义(均P>0.05),见表1。

表13组缺血性脑卒中患者基线资料比较(x¯±s)

2.23组患者血浆Hcy降低情况

治疗前3组血浆Hcy水平差异无统计学意义(P>0.05)。MTHFRA1298C基因类型(AA、AC、CC)对叶酸降低Hcy治疗有影响(F=4.127,P=0.023);3组血浆Hcy水平有随治疗时间变化的趋势(F=842.67,P<0.001),各组治疗后血浆Hcy水平均低于治疗前;MTHFRA1298C基因类型(AA、AC、CC)与治疗时间有交互作用(F=4.681,P=0.012),3组血浆Hcy水平随时间的变化趋势不同。治疗6个月时,A组血浆Hcy水平显著低于B组(t=7.324,P<0.001)和C组(t=7.285,P<0.001),见表2。

2.33组不良反应发生情况

研究期间,3组患者发生的药品不良反应主要有:畏食、恶心、腹胀、尿液变黄。上述不良反应均轻微,不用特殊临床干预。3组患者不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),见表3。

表23组缺血性脑卒中患者血浆Hcy降低情况(x±s)

表33组缺血性脑卒中患者不良反应发生情况[例(%)]

3、讨论

HHcy是缺血性心脑血管疾病的重要危险因素,Hcy通过加快体内氧自由基的生成、破坏血管内皮等途径促进血栓形成[7],同时诱发动脉血管平滑肌细胞大量增生,血管内皮变厚,致使闭塞性心脑血管病变发生[8]。针对HHcy患者,采用有效的治疗方式对Hcy进行干预,有望降低其缺血性心脑血管疾病的发病风险。叶酸是一种水溶性维生素,是临床上治疗HHcy的主要药物。其原型药物本身无降低Hcy的作用,需要在体内经MTHFR转化为5-甲基四氢叶酸,参与到甲硫氨酸循环通路,才能降低Hcy的作用[9]。因此,MTHFR酶的活性能通过5-甲基四氢叶酸的生物化学反应,影响甲硫氨酸的生物转化,进而影响血浆Hcy的高低。

人体内叶酸的日常摄入剂量不足与MTHFR酶的活性降低可能是HHcy的主要诱发因素。本研究中,A组患者MTHFR基因类型为AA类型,该基因类型患者叶酸在体内转化为5-甲基四氢叶酸的速度快于AC和CC类型,该类型患者体内血浆Hcy的值偏高,可能与患者日常摄入叶酸剂量偏低有关系,因此在每天规律服用叶酸片后,在治疗3个月和6个月,血浆Hcy较服药前均有明显降低;而B组和C组患者,体内血浆Hcy升高,可能是MTHFR基因突变和日常摄入叶酸剂量偏低双重作用的结果,单独补充叶酸只能解决叶酸摄入不足方面的问题,因此降低Hcy治疗的起效速度慢于A组。这表明,在应用叶酸降低Hcy治疗时,MTHFRA1298C基因AA类型患者能更早获益。李宗锋等[10]通过分析老年HHcy患者Hcy与叶酸的关系,提示HHcy的发生可能与患者体内叶酸水平下降有关,这与本研究中患者通过规律补充叶酸治疗6个月后患者Hcy有明显下降的研究结论相一致。目前,有关MTHFR基因多态性的临床应用的报道[11],针对MTHFRC677T的研究较为常见,而具体到MTHFRA1298C对叶酸降低Hcy治疗的影响的报道则较为少见。因此,本研究结论尚需多中心、更大样本量的研究予以证实。

本研究中3组患者均按照每天口服叶酸5mg治疗,治疗6个月时,A组患者血浆Hcy明显低于B组和C组,血浆Hcy的下降幅度明显大于B组和C组。这表明,MTHFRA1298C基因类型明显影响HHcy患者降低血浆Hcy的治疗效果,其中AA型患者用叶酸降低Hcy效果较好,携带MTHFR1298C患者用叶酸降低Hcy疗效会降低。在应用叶酸降低Hcy治疗方面,针对叶酸的最佳给药剂量,目前尚未有较为统一的研究结论。杜梦琳[12]比较了0.8、1.25、5mg/d叶酸片降低高血压患者的Hcy治疗效果,研究结果提示5mg/d叶酸片降低Hcy疗效更好。也有文献[13]报道,血浆Hcy水平与叶酸的消耗呈负相关,在叶酸摄入量超过0.4mg/d时达到稳定基线水平。詹建梅等[14]研究了不同剂量B族维生素对HHcy脑梗死患者二级预防的作用,结果显示B族维生素可明显降低患者血浆Hcy水平,且大剂量B族维生素的干预作用更明显。综合考虑,本研究采用每天5mg给药降低Hcy治疗。在研究中,密切观察与叶酸相关的药物不良反应。经过6个月的临床观察,3组患者所发生的与叶酸相关的药物不良反应主要包括有畏食、恶心、腹胀、尿液变黄,由于叶酸能以原型药物从尿液中排除,其安全范围大,纳入研究患者肝肾功能均正常,因此上述药品不良反应均不需要特殊的临床干预,也不用做停药处理。

本研究中的部分患者,经过6个月的治疗,其血浆Hcy依旧没有降低到正常范围(<15μmol/L)之内,这可能与患者存在吸烟、喝酒、熬夜等不健康生活习惯相关,这些因素可能会通过影响叶酸的吸收、体内生物化学反应等途径最终影响患者Hcy的高低[15]。HANLY等[16]通过系统评价高同型半胱氨酸血症的影响因素,提出增加叶酸和维生素B的补充,增加每日水果和蔬菜的摄入量,定期锻炼和抑制吸烟和饮酒是预防高同型半胱氨酸血症的潜在策略。这提示临床在降低同型半胱氨酸的治疗中,单用叶酸治疗可能存在一定的局限性。更完善的治疗方案,有待进行更多研究去实现。

综上所述,MTHFRA1298C基因多态性显著影响叶酸降低血浆Hcy的治疗效果,检测MTHFRA1298C基因多态性在高Hcy血症治疗中具有一定的指导价值,值得做进一步深入研究。

参考文献：

[4]张晶,丛洪良,曹路,等.亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与高同型半胱氨酸血症的相关性[J].中华老年心脑血管病杂志,2017,19(11):1166-1169.

[5]中华医学会神经病学分会,中华医学会神经病学分会脑血管病学组.中国缺血性脑卒中和短暂性脑缺血发作二级预防指南2014[J].中华神经科杂志,2015,48(4):258-273.

[6]寇雪莲,陈琳迪,何松彬,等.高同型半胱氨酸血症对急性脑梗死患者预后的影响[J].中华全科医学,2015,13(5):697-699.

[8]张泽丹,曾莉,谭平.叶酸联合维生素B12治疗老年冠心病慢性心力衰竭伴高同型半胱氨酸血症的疗效分析[J].河北医学,2018,24(2):313-317.

[10]李宗锋,李洪臣.中老年高脂血症患者同型半胱氨酸与维生素B12及叶酸水平调查[J].中华实用诊断与治疗杂志,2014,28(5):516-517.

[11]周佳菁,袁箐,韩峻松,等.亚甲基四氢叶酸还原酶多态性的临床应用研究进展[J].医学综述,2018,24(7):1266-1272.

[12]杜梦琳.不同剂量叶酸片降同型半胱氨酸疗效观察[J].中西医结合心脑血管病杂志,2016,14(6):664-665.

[13]王冬,于旭红,沙杭.叶酸的临床应用现状[J].中国临床药理学杂志,2016,32(19):1813-1816,1820.

[14]詹建梅,林海燕,王进华.不同剂量B族维生素对高同型半胱氨酸血症脑梗死患者的二级预防作用[J].中华全科医学,2014,12(6):917-919.

[15]谷欣荣,张晓中.脑梗死患者血清同型半胱氨酸水平与患者病情严重程度的关系[J].安徽医学,2017,38(12):1597-1599.