摘要:目的观察急性胰腺炎患者血清Toll样受体9(Toll-likereceptor9,TLR9)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetallopeptidase-9,MMP-9)水平变化,探讨其预测继发感染、器官功能衰竭的价值。方法72例急性胰腺炎患者,均给予改善微循环、解痉止痛、抑制胰酶分泌、抗感染等规范治疗。治疗7d后,发生继发感染者31例为感染组,未发生继发感染者41例为未感染组;发生器官功能衰竭者8例为衰竭组,未发生器官功能衰竭者64例为未衰竭组。比较感染组与未感染组、衰竭组与未衰竭组一般资料及血清TLR9、MMP-9、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平;多因素logistic回归分析急性胰腺炎患者发生继发感染及器官功能衰竭的影响因素;绘制ROC曲线评估血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者继发感染及器官功能衰竭发生风险的效能。结果感染组与未感染组,衰竭组与未衰竭组年龄、性别比例及合并糖尿病、高血压、高脂血症比率比较差异均无统计学意义(P>0.05);感染组血清TLR9[(17.30±2.37)μg/L]、MMP-9[(29.42±9.82)μg/L]、TNF-α[(66.40±5.37)μg/L]水平高于未感染组[(14.49±1.71)、(17.02±4.02)、(63.22±1.79)μg/L](P<0.05),血清IL-6[(56.45±4.32)μg/L]水平与未感染组[(57.21±4.29)μg/L]比较差异无统计学意义(P>0.05);衰竭组血清TLR9[(19.23±2.12)μg/L]、MMP-9[(65.56±30.91)μg/L]、IL-6[(59.67±7.60)μg/L]水平高于未衰竭组[(15.07±2.13)、(23.57±18.63)、(54.11±2.11)μg/L](P<0.05),血清TNF-α[(62.35±3.23)μg/L]水平与未衰竭组[(61.95±3.18)μg/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,血清TLR9(OR=1.558,95%CI:1.428~2.727,P<0.001)、MMP-9(OR=1.818,95%CI:1.748~1.895,P<0.001)、TNF-α(OR=1.372,95%CI:1.211~1.979,P<0.001)是急性胰腺炎患者发生继发感染的影响因素;血清TLR9(OR=1.942,95%CI:1.933~3.012,P<0.001)、MMP-9(OR=1.978,95%CI:1.926~3.969,P<0.001)、IL-6(OR=1.950,95%CI:1.929~2.971,P<0.001)是急性胰腺炎患者发生器官功能衰竭的影响因素。ROC曲线分析结果显示,TLR9以18.134μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的AUC为0.806(95%CI:0.700~0.911,P<0.05),灵敏度为87.1%,特异度为97.6%;MMP-9以32.635μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的AUC为0.819(95%CI:0.708~0.929,P<0.05),灵敏度为83.9%,特异度为95.1%;TLR9以20.216μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的AUC为0.824(95%CI:0.722~0.926,P<0.05),灵敏度为88.0%,特异度为97.9%;MMP-9以70.123μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的AUC为0.840(95%CI:0.725~0.955,P<0.05),灵敏度为84.0%,特异度为95.7%。结论发生继发感染、器官功能衰竭的急性胰腺炎患者血清TLR9、MMP-9水平升高,TLR9、MMP-9在评估急性胰腺炎患者预后中有较高价值。
急性胰腺炎患者主要因继发感染及器官功能衰竭死亡[1]。因此,早期准确预测急性胰腺炎患者继发感染、器官功能衰竭发生风险是指导治疗、改善患者预后的关键。Toll样受体9(Toll-likereceptor9,TLR9)对多种免疫细胞产生刺激,促进大量细胞因子及趋化因子的合成与分泌,加重炎性反应,不利于预后[2]。机体发生损伤后,基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)-9可被激活,进而损伤基质,引发水肿,加重组织、细胞受损程度[3]。推测TLR9、MMP-9可能参与了急性胰腺炎继发感染及器官功能衰竭的发生、发展。本研究探讨急性胰腺炎患者血清TLR9、MMP-9水平变化及在继发感染、器官功能衰竭预测中的价值,报道如下。
1、资料与方法
1.1一般资料
2018年8月-2019年12月广州医科大学附属第一医院诊治急性胰腺炎患者72例,男41例,女31例;年龄46~59(53.12±3.03)岁。入选标准:(1)诊断均符合《中国急性胰腺炎诊治指南(草案)》[4];(2)年龄≥20岁;(3)临床资料完整。排除标准:(1)免疫性疾病患者;(2)恶性肿瘤患者;(3)重要脏器功能不全者;(4)入组前1周内服用过激素等可能影响继发感染及器官功能衰竭评估的药物者;(5)精神异常不配合研究者。本研究经广州医科大学附属第一医院伦理委员会批准通过,研究对象均签署知情同意书。
1.2方法
1.2.1临床资料收集
采集患者年龄、性别、体质量以及高血压、糖尿病、高脂血症病史。
1.2.2血清学指标检测
患者于入院次日清晨采集空腹外周静脉血2mL,离心半径13.5cm,3000r/min离心10min分离血清,-40℃冰箱保存。采用放射免疫法测定血清TLR9水平,采用ELISA法测定血清MMP-9、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)水平。试剂盒由上海恒远生物科技有限公司提供,均严格按照试剂盒说明书进行操作。
1.2.3治疗及分组
72例患者均给予改善微循环、解痉止痛、抑制胰酶分泌、抗感染、营养支持、加强重症监护等规范治疗。治疗7d后,依据继发感染相关标准[5],31例发生继发感染者为感染组,41例未发生继发感染者为未感染组。依据器官功能衰竭相关标准[5],8例发生器官功能衰竭者为衰竭组,64例未发生器官功能衰竭者为未衰竭组。
1.3统计学处理
应用SPSS24.0软件进行统计分析,正态分布计量资料以均数±标准差(x¯±s)表示,组间比较采用独立样本t检验;计数资料比较采用χ2检验;多因素logistic回归分析急性胰腺炎患者发生继发感染、器官功能衰竭的影响因素;绘制ROC曲线,评估血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者发生继发感染、器官功能衰竭风险的效能;检验水准α=0.05。
2、结果
2.1感染组与未感染组一般资料及血清学指标比较
感染组血清TLR9、MMP-9、TNF-α水平高于未感染组(P<0.05);2组年龄,性别比例,体质量,合并高血压、糖尿病、高脂血症比率及血清IL-6水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1。
表1感染组与未感染组一般资料及血清学指标比较
2.2衰竭组与未衰竭组一般资料及血清学指标比较
衰竭组血清TLR9、MMP-9、IL-6水平高于未衰竭组(P<0.05);2组年龄,性别比例,体质量,合并高血压、糖尿病、高脂血症比率及血清TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。
表2衰竭组与未衰竭组一般资料及血清学指标比较
2.3急性胰腺炎患者发生继发感染影响因素的多因素logistic回归分析
以是否发生继发感染为因变量,以血清TLR9、MMP-9、TNF-α为自变量,纳入模型进行多因素logistic回归分析,结果显示血清TLR9、MMP-9、TNF-α是急性胰腺炎患者继发感染的影响因素。见表3-4。
表3变量赋值表
表4急性胰腺炎患者发生继发感染影响因素的多因素logistic回归分析结果
2.4急性胰腺炎患者发生器官功能衰竭影响因素的多因素logistic回归分析
以是否发生器官功能衰竭为因变量,以血清TLR9、MMP-9、IL-6为自变量,纳入模型进行多因素logistic回归分析,结果显示血清TLR9、MMP-9、IL-6是急性胰腺炎患者发生器官功能衰竭的影响因素。见表5-6。
表5变量赋值表
表6急性胰腺炎患者发生器官功能衰竭的多因素logistic回归分析结果
2.5血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的效能
ROC曲线分析结果显示,血清TLR9以18.134μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的AUC为0.806(95%CI:0.700~0.911,P<0.05),灵敏度为87.1%,特异度为97.6%;MMP-9以32.635μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的AUC为0.819(95%CI:0.708~0.929,P<0.05),灵敏度为83.9%,特异度为95.1%;TLR9联合MMP-9预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的AUC为0.854(95%CI:0.749~0.958,P<0.05),灵敏度为83.5%,特异度为92.7%。见图1。
图1血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者继发感染发生风险的ROC曲线图
2.6血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的效能
血清TLR9以20.216μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的AUC为0.824(95%CI:0.722~0.926,P<0.05),灵敏度为88.0%,特异度为97.9%;MMP-9以70.123μg/L为最佳截断值,预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的AUC为0.840(95%CI:0.725~0.955,P<0.05),灵敏度为84.0%,特异度为95.7%;TLR9联合MMP-9预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的AUC为0.877(95%CI:0.787~0.966,P<0.05),灵敏度为83.9%,特异度为93.6%。见图2。
图2血清TLR9、MMP-9预测急性胰腺炎患者器官功能衰竭发生风险的ROC曲线图
3、讨论
继发感染及器官功能衰竭是导致急性胰腺炎患者死亡的两大因素。急性胰腺炎患者继发感染的发生率为40%~70%,器官功能衰竭的发生率为9%~12%[6]。本研究72例患者继发感染发生率为43.06%,器官功能衰竭发生率为11.11%,与上述研究相近。
TNF-α可加重体内炎性反应程度,增加急性胰腺炎患者胰腺细胞受损程度[7]。IL-6可诱导B细胞分化,进而释放免疫球蛋白,参与免疫反应,促进急性胰腺炎的发生、发展[8]。本研究结果显示,感染组血清TNF-α水平高于未感染组,衰竭组血清IL-6水平高于未衰竭组,表明TNF-α、IL-6可能与急性胰腺炎患者发生继发感染、器官功能衰竭有关。但TNF-α、IL-6在糖脂代谢紊乱、侵入性操作等刺激下也可出现异常升高,受影响因素较多,可能对结果产生干扰,仅依靠二者来评估继发感染及器官功能衰竭发生风险的局限性大。TLR9能有效识别病原及损伤相关分子模式,介导病原及损伤分子的炎性因子,从而引发炎性反应[9]。MMP-9能损伤血管壁,损伤组织与细胞功能[10]。本研究结果显示,感染组血清TLR9、MMP-9水平高于未感染组;衰竭组血清TLR9、MMP-9水平高于未衰竭组;多因素logistic回归分析结果显示,血清TLR9、MMP-9是急性胰腺炎患者继发感染、器官功能衰竭的影响因素,提示血清TLR9、MMP-9水平与急性胰腺炎患者继发感染、器官功能衰竭的发生密切相关。分析原因:(1)TLR9激活后可使多种趋化因子及炎性因子合成及释放,加重急性胰腺炎的病变程度;TLR9激活后产生的趋化因子及炎性因子可通过自分泌进一步加重胰腺组织、细胞的活化程度,且可导致多种生理活动发生异常,加重炎性反应,不利于预后[11]。(2)MMP-9可对血管基底膜成分产生作用,与机体组织内膜屏障的损伤密切相关[12]。
本研究ROC曲线分析结果显示,血清TLR9、MMP-9单独及联合预测急性胰腺炎患者继发感染、器官功能衰竭发生风险的AUC均>0.80,提示检测急性胰腺炎患者血清TLR9、MMP-9水平可预测其继发感染及器官功能衰竭发生风险,以指导早期风险评估与防治,改善患者预后。但本研究样本量较小,且研究时间短,尚需进一步行大样本量、多中心研究证实血清TLR9、MMP-9在急性胰腺炎患者预后评估中的作用。
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基金:广东省自然科学基金(2018A030313970);广州市卫生和计划生育科技项目(20192A011014)
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