首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 内科论文 > 消化内科论文 > 分析白细胞介素-34水平与幽门螺杆菌感染相关性胃疾病的关系

分析白细胞介素-34水平与幽门螺杆菌感染相关性胃疾病的关系

2020-06-16 183 上传者：管理员

摘要：目的：检测胃癌、慢性胃炎患者血清中白细胞介素-34(IL-34)水平,探讨IL-34在幽门螺杆菌感染相关性胃疾病中的表达情况,以确定IL-34能否作为幽门螺杆菌感染相关性胃疾病的血清学标志物。方法：从270例患有胃部疾病的住院患者中筛选出39例胃癌患者和21例慢性胃炎患者,采用酶联免疫吸附试验测定患者血清中IL-34水平,比较胃癌组、慢性胃炎组与40例体检健康者IL-34水平的表达差异。应用幽门螺杆菌抗体检测试剂盒检测上述患者和健康对照者幽门螺杆菌的感染情况。分析胃癌组和慢性胃炎组中IL-34与甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)的相关性。结果：胃癌组IL-34的表达水平为6.57(3.86～9.71)pg/mL,慢性胃炎组IL-34的表达水平为12.71(2.89～19.42)pg/mL,与健康对照组比较,血清IL-34水平均升高,差异具有统计学意义(U=465,P<0.01;U=203,P<0.01)。39例胃癌患者中,幽门螺杆菌阳性12例(30.77%),21例慢性胃炎组中,幽门螺杆菌阳性5例(20.81%)。在胃癌患者中,幽门螺杆菌阴性组IL-34的表达水平为7.29(5.07～9.71)pg/mL,与健康对照组比较,有所升高,差异具有统计学意义(U=294,P<0.01)。在慢性胃炎患者中,幽门螺杆菌阴性组IL-34的表达水平为13.60(2.80～19.41)pg/mL,与健康对照组比较,有所升高,差异具有统计学意义(U=157,P<0.05)。结论：血清IL-34水平在胃癌、慢性胃炎中表达增高,可以作为幽门螺杆菌感染阴性的胃癌、慢性胃炎的血清学标志物。

关键词：
幽门螺杆菌
慢性胃炎
消化内科
白细胞介素-34
胃癌
加入收藏

慢性胃炎是指由不同病因所引起的发生在胃黏膜上的慢性炎症性病变，若治疗不及时，可导致胃黏膜的肠上皮化生、萎缩、异型增生和癌变，发展成为胃溃疡甚至是胃癌。全球有超过一半的人曾患有慢性胃炎[1]。据全球癌症最新数据统计，恶性肿瘤发病率中胃癌高居第5位，其病死率居恶性肿瘤病死率第3位[2]。慢性胃炎和胃癌作为严重影响人类健康的疾病越来越受到关注。幽门螺杆菌（HP）是引起人类慢性活动性胃炎、消化性溃疡的重要致病因素，是世界上感染率极高的一种病原菌。HP感染后，浸润到胃黏膜上的中性粒细胞、单核细胞产生炎性细胞因子，如白细胞介素-1(IL-1）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等，是造成胃黏膜损伤的重要因素[3,4]。IL-34作为一个新的细胞因子，在免疫和炎性反应中发挥重要作用，参与多种疾病的发生、发展和预后。目前尚无文献报道IL-34在胃疾病中的水平变化，以及是否在HP感染进程中发挥作用。本研究旨在探讨IL-34在幽门螺杆菌相关性胃疾病中的表达情况，以确定IL-34能否作为HP感染相关性胃疾病的血清学标志物。

1、资料与方法

1.1一般资料

纳入2018年10月至2019年5月重庆医科大学附属第一医院（下称本院）新入院的患有胃部疾病的患者共270例，在经过分析筛选后共收集胃癌39例，慢性胃炎21例，所有胃癌、慢性胃炎患者均符合以下条件：（1）胃镜和组织病理学确诊为慢性胃炎或者胃癌；（2）排除合并有自身免疫性疾病、感染、其他肿瘤等疾病的病例；（3）排除纳入研究前已经进行过胃癌根治术或者放化疗的病例；（4）排除就诊前4周出现过急性感染或者重大刺激的病例。40例健康对照者来自同时期本院体检中心的健康人群。本研究经本院伦理委员会论证通过，患者或家属签署知情同意书后实施。

1.2方法

1.2.1血清IL-34水平检测

所有待检查的患者抽取静脉血4mL，离心后留取血清，标本置于-80℃保存待检。应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验试剂盒（R&DSystems,USA）检测血清IL-34水平，操作条件和步骤严格按照说明书进行：（1）准备试剂、标准品、样品，取出反应条；（2）每孔加100μL稀释剂RD1-77;(3）每孔加50μL样品或者标准品，震荡混匀，室温下孵育2h;(4）每孔加400μL洗液，清洗4次；（5）加200μL酶结合物，震荡混匀，室温下孵育2h;(6）重复第4步；（7）加200μL底物混合物，避光放置30min;(8）加50μL终止液，Tecan酶标仪（Tecan奥地利有限公司）比色（测定波长450nm，参比波长620nm);(9）通过标准曲线计算得出患者血清IL-34水平。

1.2.2HP感染检测

采用幽门螺杆菌检测试剂盒（胶体金法，北京康美天鸿生物科技有限公司），定性检测患者和健康对照者血清中幽门螺杆菌抗体存在的情况，以明确区分住院患者是否感染了幽门螺杆菌。操作严格按照说明书进行：（1）待试剂盒复温后取出测试板；（2）在测试板样品孔中加4滴血清；（3)15～20min内观察结果；（4）对照线和测试线都出现红色判定为阳性，即患者血清中存在幽门螺杆菌抗体，判断患者幽门螺杆菌感染阳性。

1.2.3肿瘤标志物检测

采用双抗体夹心电化学发光技术，运用Cobas8000e602全自动电化学发光分析仪对胃癌患者和慢性胃炎患者血清中肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖类抗原19-9(CA19-9）进行定量检测，参考区间：AFP:0.6～5.0ng/mL、CEA:0.2～10.0ng/mL、CA19-9:0～27.0U/mL。操作条件和步骤严格按照仪器说明书进行。

1.3统计学处理

所有数据资料采用SPSS20.0软件进行统计分析。计量资料数据不符合正态分布，结果以中位数（四分位数）[M(P25～P75）]进行统计学描述，组间比较采用曼-惠特尼U检验（Mann-WhitneyUtest），相关性分析采用Spearman秩相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1一般临床特征描述

39例胃癌患者、21例慢性胃炎患者和40例健康对照者的一般临床特征描述见表1。在39例胃癌患者中，幽门螺杆菌感染阳性的患者12例（30.77%），幽门螺杆菌阴性的患者27例。21例慢性胃炎组中，幽门螺杆菌感染阳性的患者5例（20.81%），幽门螺杆菌阴性患者16例。40例健康对照幽门螺杆菌检测均为阴性。

表1胃癌、胃炎患者与健康对照组一般临床资料比较

2.2胃癌、慢性胃炎组对照组血清IL-34表达水平比较

胃癌组IL-34的表达水平为6.57(3.86～9.71)pg/mL，与健康对照组比较，明显升高，差异具有统计学意义（U=465,P<0.01）。慢性胃炎组IL-34的表达水平为12.71(2.89～19.42)pg/mL，与健康对照组比较，彩虹显升高，差异具有统计学意义（U=203,P<0.01）。胃癌组和慢性胃炎组比较，IL-34表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

表2胃癌、慢性胃炎和健康组IL-34表害水平比较[M(P25～P75)]

2.3胃癌、慢性胃炎组IL-34表达的水平比较

在39例胃癌患者中，HP阴性组IL-34的表达水平为7.29(5.07～9.71)pg/mL，与健康对照组比较，明显升高，差异具有统计学意义（U=294,P<0.01）。在慢性胃炎患者中，HP阴性组IL-34的表达水平为13.60(2.80～19.41)pg/mL，与健康对照组比较，明显升高，差异具有统计学意义（U=157,P<0.05）。胃癌和慢性胃炎患者中HP阳性组IL-34的水平分别与健康对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。见表3。

表3胃癌、慢性胃炎组IL-34表达水平比较[M(P25～P75)]

2.4肿瘤标志物AFP、CEA、CA19-9在胃癌和慢性胃炎组中的水平比较

AFP在胃癌组的表达水平为3.20(2.30～3.90)ng/mL，在慢性胃炎组的表达水平为2.40(1.02～3.30)ng/mL，二者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。CEA在胃癌组的表达水平为2.40(1.40～5.20)ng/mL，在慢性胃炎组的表达水平为1.46(1.18～2.70)ng/mL，二者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。CA19-9在胃癌组的表达水平为10.73(5.10～35.40)U/mL，在慢性胃炎组的表达水平为10.90(7.40～21.35)U/mL，二者比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表4。

表4AFP、CEA、CA19-9在胃癌、慢性胃炎组中的水平比较[M(P25～P75)]

2.5胃癌、慢性胃炎组血清IL-34与肿瘤标志物AFP、CEA、CA19-9的相关性分析

由Spearman秩相关分析可知，21例慢性胃炎患者中IL-34和肿瘤标志物AFP(r=0.124,P=0.594）、CEA(r=0.235,P=0.306）、CA19-9(r=0.014,P=0.953）均无相关性。39例胃癌患者中IL-34和肿瘤标志物AFP(r=-0.069,P=0.678）、CEA(r=-0.166,P=0.312）、CA19-9(r=0.069,P=0.678）均无相关性。

3、讨论

慢性胃炎是发生在胃黏膜上的慢性炎性病变，其发病率在各种胃病中居首位。目前，慢性胃炎仍然是最常见的感染性疾病之一，因其可发展成为胃溃疡或者胃癌，仍受到研究者们的关注。胃癌是起源于胃黏膜上皮细胞恶性增殖所致的肿瘤，在我国各种恶性肿瘤中发病率居前列。据全球癌症最新数据统计，恶性肿瘤发病率中胃癌高居第5位，其病死率居恶性肿瘤病死率第3位，而且胃癌患者5年内的生存率低于30.00%[5,6,7]。随着诊断技术的不断进步，胃疾病的诊断也变得越来越精确。胃镜检查可对胃内的病变和情况做初步的判断，病理学的检查可用于确诊胃内的恶性病变，但二者均具有滞后性，无法及时发现早期胃部恶性病变的患者。而胃疾病，尤其是胃癌，其疗效的好坏以及远期生存率的高低主要取决于发现时所处的疾病病程。在这种情况下，可用于早期辅助诊断胃癌诊断的生物学标志物就具有非常重要意义。目前在研究的人类表皮生长因子受体2、上皮钙黏素、肝细胞生长因子受体、微RNA均为热门胃癌生物学标志物[7,8,9,10]。本研究也旨在发现可用于早期辅助诊断胃癌的生物学标志物。

幽门螺杆菌是由WARREN和MARSHALL于1983年从慢性胃炎和消化性溃疡患者胃黏膜中分离出来的一种弯曲样杆菌，是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因，超过80.00%的携带者并不会出现症状。HP在胃部的存活和繁殖依靠多种病理因子，如VacA、NapA、CGT、GGT等，同时可以操控多种细胞外免疫受体，如integrin-β2(CD18）、EGFR、CD74等，引发胃部的进一步病变[11]。IL-34是于2008年新发现的细胞因子，主要表达于人体的巨噬细胞、成纤维细胞、小神经胶质细胞和M-CSF共同作为CSF-1的配体。据研究发现，IL-34参与单核巨噬细胞的存活和分化，后者能产生多种细胞因子如IL-6、TNF等。已有研究报道血清IL-34能预测非病毒性肝癌的生存率[12],IL-34mRNA在不同乳腺癌型别中表达有差异[13]，但IL-34与HP相关性胃疾病的关系尚少有无相关报道。

本研究发现，胃癌组IL-34的表达水平为6.57(3.86～9.71)pg/mL，慢性胃炎组IL-34的表达水平为12.71(2.89～19.42)pg/mL，与健康对照组比较，血清IL-34水平均升高，差异均有统计学意义（U=465,P<0.01;U=203,P<0.01）。有文献报道，IL-34在应激细胞中的mRNA和蛋白水平上调，这种诱导主要受NF-κB调节[14]。NF-κB是一组转录因子（RelA、RelB、c-Rel、NF-κB1、NF-κB2）的集合，可调节一大类靶基因如免疫相关受体、细胞因子、促炎因子等的表达。胃部炎症会引起巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等的浸润，同时分泌一些促炎因子，如IL-6、IL-10、IL-11、IL-32等。高水平的促炎因子会刺激细胞内激酶的磷酸化，诱导转录因子如NF-κB、AP-1等表达，因此IL-34在胃癌和慢性胃炎中水平升高，尤其在慢性胃炎中升高更为明显。

在胃癌患者中，HP阴性组IL-34的表达水平为7.29(5.07～9.71)pg/mL与健康对照组比较，明显升高，差异具有统计学意义（U=294,P<0.01）。在慢性胃炎患者中，HP阴性组IL-34的表达水平为13.60(2.80～19.41)pg/mL，与健康对照组比较，明显升高，差异具有统计学意义（U=157,P<0.05）。胃癌和慢性胃炎患者中HP阳性组IL-34的水平分别与健康对照组比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。这说明IL-34在幽门螺杆菌阴性的胃癌和慢性胃炎患者体内表达更为活跃。有文献报道，HP分为Ⅰ型和Ⅱ型，前者与后者相比可产生细胞毒素，毒性比较强。Ⅰ型HP菌株携带有约40kb的特殊基因片段，即cag致病岛（cagPAI），只存在于致病力强的菌株上。而HP携带cagPAI的菌株比cagPAI阴性的菌株具有更强激活NF-κB途径的能力，因此，cagPAI也被确认为是NF-κB的重要诱导因子[15]。本研究中并未对幽门螺旋杆菌阳性的患者进行cagPAI的检测，就无法确认研究中所检测到的慢性胃炎和胃癌患者中感染的HP菌株是否携带cagPAI。根据本研究结果推测，纳入实验的胃癌和慢性胃炎的患者可能感染的是cagPAI阴性的HP菌株，导致其无法激活NF-κB通道，进而影响IL-34的表达水平。

4、结论

因此，血清IL-34可以作为幽门螺杆菌感染阴性的胃癌、慢性胃炎的血清学标志物。

参考文献：

[2]莫丽蓉,杨金芳,李雪,等.胃癌生物学标志物的相关研究进展[J].医学综述,2019,25(7):1327-1331.

[7]王红旭,赖晓霏.血清IL-34水平与SLE疾病活动度关系的研究[J].中国免疫学杂志,2017,33(8):1232-1235.

周红菊,杨扬,向瑜.分析血清IL-34水平与幽门螺杆菌感染相关性胃疾病的关系[J].国际检验医学杂志,2020,41(11):1333-1336.

基金:重庆市科学技术委员会基础研究与前沿探索基金项目(cstc2018jcyjAX0748).