摘要:目的分析艾滋病合并结核患者(AIDSandTuberculosisCo-infection,AIDS-TB)诊断中γ-干扰素释放试验(IGRA)的应用价值。方法选取2023年1-12月期间重庆市合川区人民医院收治的50例AIDS-TB患者,作为观察组;选取50例同期收治的未感染HIV的结核病患者,作为对照组。对两组患者均进行IGRA检测,比较检测结果,分析CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率的相关性。结果观察组的IGRA检测结果阳性率高于对照组,P<0.05。观察组的CD4+T淋巴细胞计数低于对照组,P<0.05。CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率呈负相关(r=-0.625,P<0.01)。结论IGRA检测结果在AIDS-TB患者中具有较高的敏感性和特异性,CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率呈负相关。因此,IGRA可辅助诊断AIDS-TB患者。
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在全球范围内,艾滋病(AIDS)和结核病(TB)都是严重的公共卫生问题,不仅严重威胁人类健康,也影响全球经济和社会发展[1]。同时,AIDS和TB往往相互关联,形成恶性循环[2]。AIDS-TB患者是指同时患有AIDS和TB的患者,这类患者的免疫系统功能严重受损,会导致结核病的诊断和治疗变得更加复杂和困难[3]。AIDS是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的,会破坏人体的免疫系统,故患者极易出现肿瘤[4]。TB是由结核分枝杆菌感染所引起的,具有传染性,一般通过空气传播,会影响人体的肺部,也可能侵犯其他器官[5]。若HIV感染者的免疫系统受损严重,则更易感染TB,且病情通常较为严重。γ-干扰素释放试验(IGRA)是一种新型结核病诊断方法,是基于T淋巴细胞免疫反应的一种诊断方法。相比传统的结核菌素皮肤试验(TST),IGRA操作简便、灵敏度高、特异性强,优势明显[6]。IGRA可通过检测患者外周血中特异性T淋巴细胞对结核分枝杆菌抗原的反应,判断患者是否感染结核分枝杆菌,不依赖于细胞介导的免疫反应下降。因此,AIDS患者等免疫系统受损患者应用该诊断方法的价值更高。基于此,本研究分析AIDS-TB患者与未感染HIV的TB患者IGRA检测结果的差异,进一步探讨IGRA在AIDS-TB患者诊断中的应用价值。
1、资料与方法
1.1一般资料
选取2023年1-12月期间重庆市合川区人民医院收治的50例AIDS-TB患者,作为观察组;选取50例同期收治的未感染HIV的结核病患者,作为对照组。观察组年龄范围22~63岁,平均值(44.01±3.07)岁;其中,男性30例,女性20例。对照组年龄范围21~64岁,平均值(44.07±3.01)岁;其中,男性29例,女性21例。两组一般资料对比,P>0.05,具有可比性。排除标准:①合并其他严重感染性疾病;②严重心、肝、肾功能不全;③对IGRA检测成分过敏;④无法配合。纳入标准:①符合AIDS或TB的诊断标准;②自愿参与研究;③精神状态正常;④能配合常规操作。
1.2方法
(1)IGRA检测:QuantiFERON-TBGoldIn-Tube(QFT-GIT)试剂盒操作步骤。①样本准备:采集患者外周血样本前,嘱患者禁食6h以上。采血时,使用无菌采血管。采集静脉血量约5~10ml,并在室温下静置30min,使红细胞沉降,小心分离血清。②试剂准备:取出QuantiFERONTBGoldIn-Tube(QFT-GIT)试剂盒中的所有试剂和材料,按照说明书要求做好室温平衡工作。③加样:血清分离后,按照试剂盒说明书要求加入至IGRA检测管中。每个检测管中加入的血清量应符合说明书要求。④抗原添加:在每个检测管中加入结核分枝杆菌抗原溶液,轻轻摇晃混匀,让抗原与血清充分接触。⑤孵育:检测管加样后,放入恒温孵育箱中,一般为37℃,孵育18~24h。⑥终止反应:孵育结束后,依照试剂盒说明书终止反应。⑦读取结果:采用专门的读取仪对检测管中的颜色变化进行读取,按照颜色深浅判断检测结果。(2)CD4+T淋巴细胞计数:流式细胞仪检测步骤。①样本准备:采集患者外周血样本后,加入EDTA抗凝剂,轻轻混匀,做好抗凝处理。②细胞分离:使用淋巴细胞分离液将血液样本进行分层处理,分离出单个核细胞(PBMCs)。③细胞洗涤:分离出PBMCs,用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤2次,目的是去除未结合的抗体和杂质。④细胞重悬:细胞洗涤后,重悬于PBS中,将细胞浓度调整为1×10^6细胞/μl。⑤标记:使用CD4+T淋巴细胞特异性抗体(如CD4-FITC)标记细胞,严格按照说明书操作。⑥流式细胞仪检测:将标记后的细胞样本注入流式细胞仪,做好CD4+T淋巴细胞计数。⑦数据分析:使用流式细胞仪配套的软件分析检测数据,计算出CD4+T淋巴细胞计数。(3)注意事项:在检测过程中,严格遵循实验室操作流程,保证实验结果的准确和可靠。对于AIDS-TB患者,应特别注意生物安全,防止出现交叉感染。
1.3观察指标
(1)记录两组患者的IGRA检测结果。(2)记录两组患者的CD4+T淋巴细胞计数。
1.4统计学处理
本研究数据使用SPSS22.0统计软件进行分析。计量资料以x±s表示,采用t检验;计数资料以率表示,采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1IGRA阳性率
观察组IGRA阳性率高于对照组,P<0.05。见表1。
表1两组IGRA阳性率对比
2.2CD4+T淋巴细胞计数
观察组CD4+T淋巴细胞计数低于对照组,P<0.05。见表2。
表2两组CD4+T淋巴细胞计数对比
2.3CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率相关性分析
CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率呈负相关(r=-0.625,P<0.01)。
3、讨论
本研究结果显示,观察组的IGRA阳性率高于对照组,P<0.05。表明,在AIDS-TB患者的诊断中,IGRA的敏感性较高。这是因为,AIDS-TB患者的免疫系统已经受损,故对结核分枝杆菌的免疫反应会有所减弱,但存在一定的免疫反应,在IGRA检测中,通常可显示出阳性结果[7]。与之相比,对照组患者的免疫系统基本上较为完整,就算感染了结核分枝杆菌,一般不会有足够的免疫反应激活IGRA检测。本研究结果显示,观察组的CD4+T淋巴细胞计数低于对照组,P<0.05。表明,AIDS患者普遍存在免疫抑制状态。HIV病毒通常主要攻击人体的CD4+T淋巴细胞,故AIDS患者的CD4+T淋巴细胞数量会减少,免疫功能被削弱[8]。在此状态下,患者感染结核分枝杆菌的风险增加,IGRA检测的阳性率也会受到影响。本研究结果显示,CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率呈负相关(r=-0.625,P<0.01)。表明,AIDS-TB患者的免疫抑制状态会影响IGRA检测结果。CD4+T淋巴细胞计数的减少会降低患者对结核分枝杆菌抗原的免疫反应能力,进而降低IGRA检测的阳性率[9]。因此,在评估IGRA检测结果时,应充分考虑患者的CD4+T淋巴细胞计数,特别是AIDS-TB患者[10]。
需要注意的是,虽然IGRA在AIDS-TB患者诊断中的敏感性较高,但仍存在局限性,如无法区分活动性感染和既往感染,且也会受到其他感染或药物的影响。以上结果对于临床实践具有重要意义。对于AIDS-TB患者而言,IGRA可作为辅助诊断工具,临床医生可更早地识别出TB。同时,CD4+T淋巴细胞计数也可作为评估AIDS-TB患者免疫状态的指标。未来可进一步探讨IGRA在不同AIDS-TB患者亚组中的应用,探究如何结合其他检测方法来提高诊断的准确性。
综上所述,IGRA在AIDS-TB患者诊断中的敏感性和特异性均较高,可作为AIDS-TB患者诊断的辅助手段。同时,CD4+T淋巴细胞计数与IGRA阳性率呈负相关,故在解读IGRA结果时,应考虑患者的免疫功能状态。
参考文献:
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文章来源:赵余,李晓霞.γ-干扰素释放试验在艾滋病合并结核患者诊断中的应用价值[J].生命科学仪器,2025,23(04):39-41.
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