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细针穿刺在经典型霍奇金淋巴瘤诊断中的应用及临床病理分析

2025-07-22 49 上传者：管理员

摘要：目的:以组织学为金标准，分析并总结经典型霍奇金淋巴瘤(CHL)细针穿刺的细胞学特征及其在诊断中的应用。方法:回顾性分析本院2012年12月至2023年12月期间同时行粗针及细针穿刺，且经组织学证实为CHL的17例患者的临床资料，并复阅细针穿刺涂片、免疫细胞化学染色及其相应的组织学活检切片。结果:17例霍奇金淋巴瘤均为经典型，包括混合细胞型5例，结节硬化型10例及未能分型2例；通过细针穿刺诊断出15例CHL,另2例细针诊断为非霍奇金淋巴瘤，诊断正确率为88.2%。细针穿刺细胞形态学表现为混合淋巴细胞背景中单个散在的霍奇金细胞或多核Reed-Stenberg细胞；免疫细胞化学染色显示细胞表达CD30。结论:与组织学相比，细针穿刺具有快捷、微创的优势，且细胞形态保存完好，易识别诊断性霍奇金或Reed-Stenberg细胞，有助于CHL的快速诊断和临床处理。

关键词：
免疫细胞化学染色
快速诊断
淋巴瘤
细针穿刺
经典型霍奇金淋巴瘤
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近年来随着甲状腺细针穿刺在中国的快速普及,推动了细针穿刺在国内的发展,细针穿刺在颈部淋巴结､乳腺及其它浅表包块的快速诊断及分流处理中发挥着越来越重要的作用｡尽管细针穿刺并不是淋巴瘤的首诊方式,但其在淋巴瘤中的诊断价值已得到越来越多的肯定[1],尤其是在霍奇金淋巴瘤的诊断中,国外早已广泛应用[2],而国内关于这方面的报道相对较少｡本文旨在分析细针穿刺中经典型霍奇金淋巴瘤(cLASSICALhODGKINlYMPHOMA,chl)的细胞形态特点及诊断流程,以期提高chl的诊断水平,避免漏诊,充分发挥细针穿刺在临床诊疗中的快速分流作用｡

一、资料和方法

病例

回顾性分析北京医院2012年12月至2023年12月经组织学证实为chl的病例,共17例｡这些患者中有11位男性,6位女性,中位年龄为35岁(范围18-90岁)｡所有标本均同时进行细针穿刺及粗针穿刺或切除活检｡所有患者均无淋巴瘤病史,大部分为b超引导下浅表淋巴结穿刺,如颈部､锁骨上､腋下及颌下淋巴结,也包括少数ct引导下深部组织穿刺,如腹膜后和肺部占位穿刺｡本研究已获得医院伦理委员会批准(2024bjyyec-ky289-01)｡

穿刺方法

患者在b超或ct引导下进行细针穿刺(25g针头,bd),同期或随后行粗针或肿物切除活检｡细针穿刺时,迅速将第一针穿刺物推到2到3张玻片上,十字法涂开[3],迅速固定于95%酒精(≥20MIN)后行he染色;将第二针穿刺物全部推进hOLOGIC20ML清洗液中,充分震荡混合,离心去上清,沉淀加入细胞保存液固定30MIN上机,制作一张液基涂片(hOLOGIC,tHINpREPⓡ5000)行巴氏染色｡保证每一病例有2-4张he染色涂片及一张巴氏液基涂片｡粗针或淋巴结切除样本按常规组织学样本处理,在10%中性福尔马林固定液中固定,随后进行常规脱水､浸蜡､石蜡包埋并切片(5-6ΜM厚),光学显微镜下观察｡

细胞学涂片采用褪染及转染的方法行免疫细胞化学染色[4],免疫染色采用eNvISION两步法,所用cd30､cd15等一抗抗体､二抗抗体､显色液(dab)及自动免疫组化仪器均购自北京中杉金桥生物技术有限公司｡染色以棕黄色染色为阳性,pbs缓冲液代替一抗作为阴性对照｡所有细胞学及组织学标本均经2位高年资医师复阅｡

二、结果

临床特征

本研究中经组织学证实为chl的病例共17例(表1),全部为经典型霍奇金淋巴瘤,所有标本均同时进行细针穿刺及粗针穿刺或切除活检｡穿刺部位大部分为淋巴结,包括颈部淋巴结(5例)､锁骨上淋巴结(4例)､腋下淋巴结(2例)､颌下淋巴结(2例)､气管旁､腹膜后及腹股沟淋巴结(各1例),还有1例穿刺部位为肺｡穿刺淋巴结近乎圆形,最大径为1.5-7.8CM,平均3.4CM｡组织病理学分型:混合细胞型5例(29.4%),结节硬化型10例(58.8%),另有2例因组织过少,未能明确分型｡

细针穿刺病理形态学

典型的细胞学涂片可见单个散在或成团分布的单核霍奇金(hODGKIN)细胞(图1a)及双核或多核的rEED-sTERNBERG(r-s)细胞(图1b),统称为hrs细胞(hODGKINANDrEED-sTERNBERGCELLS)｡这些细胞体积显著大于周围的背景淋巴细胞(>5倍),可见少至中等量的嗜碱性或嗜酸性胞浆,细胞核染色质粗糙,核型不规则,可见1个或多个显著的嗜酸性核仁,大小约为1/3-1/2个淋巴细胞,其中hODGKIN细胞核仁(2-6ΜM)较r-s细胞核仁稍大｡背景中可见大小不一混杂的淋巴细胞､免疫母细胞､嗜酸性粒细胞及中性粒细胞,但未见反应性改变中常见的生发中心胞浆丰富的滤泡树突细胞及易噬体细胞｡

尽管多数经典霍奇金淋巴瘤细胞形态典型,但其形态学表现具有一定的多样性｡hrs细胞可以形似免疫母细胞,仅核仁略增大(图1c),也可呈多核马蹄样(图1d)｡细胞形态不典型时,可加做免疫细胞化学染色帮助诊断｡

免疫细胞化学染色

在细针穿刺诊断为chl的病例中,13例进行了免疫细胞化学染色,肿瘤细胞cd30染色均为阳性,呈细胞膜及核旁点状着色(图1e),均与粗针穿刺结果一致(100%)｡图1f显示形似免疫母细胞的hODGKI细胞呈cd30阳性,而周围真正的免疫母细胞cd30阴性｡其中4例标本同时进行了cd15染色,2例染色结果呈阳性,与组织学一致,其中1例cd30和cd15均呈阳性(图1g和1h);2例阴性,其中1例粗针为阳性｡与组织学相比,cd15染色的总一致率为75%｡复阅涂片发现,cd15假阴性的涂片中肿瘤细胞极少且细胞有退变,可能影响染色结果｡

三、讨论

与组织活检这个金标准相比,细针穿刺细胞学作为淋巴造血系统肿瘤的一种诊断手段[1,5],已广泛应用于chl的诊断[2,6]｡然而,国内对细针穿刺在hl中的诊断价值认识不足,仅发现少数个案报道[7-9]｡作为淋巴造血系统的常见肿瘤,经典霍奇金淋巴瘤临床常表现为颈部淋巴结肿大或纵隔包块[10],具有细胞学特征性｡本文以组织学为金标准,总结了17例chl细针穿刺的细胞学特征及免疫细胞化学染色结果,旨在提高国内病理医师对chl细针穿刺诊断的水平｡

细针穿刺诊断chl主要依靠发现诊断性的hrs细胞,而这些细胞数量较少,通常只占0.1%-10%,需要仔细观察,并与组织细胞､免疫母细胞(无显著的嗜酸性核仁)进行鉴别｡形态学上,典型的r-s细胞为双核或多核,每个细胞核内均可见显著的包涵体样核仁,核仁大小可达7-8ΜM,细胞体积较大,胞质多少不等[11];hODGKIN细胞为单个核,可见1-2个显著的嗜酸性核仁｡背景为反应性增生的淋巴细胞､嗜酸性粒细胞､浆细胞､组织细胞｡不同类型的chl形态亦有所差异,如结节硬化型chl中,hrs细胞变形成陷窝细胞,并伴有大量纤维母细胞[12],需要仔细甄别｡

细针穿刺细胞形态保存较好,相对粗针穿刺更易发现hrs细胞｡本研究中病例1由于组织硬化明显,以往粗针活检曾被多家医院误诊为炎症,而我院细针穿刺发现hrs细胞,提示霍奇金淋巴瘤,最终粗针活检确诊为chl结节硬化型｡文献报道细胞学诊断chl的准确率差别较大(从60.7%-95.8%)[1,6,11],本研究中细针穿刺诊断chl的准确率为88.2%(15/17),可为粗针活检提供有价值的参考｡

chl还需要与间变性大细胞淋巴瘤､富于t或组织细胞的大b细胞淋巴瘤､转移癌等鉴别,必要时加做免疫染色辅助诊断,如cd30､cd15､cd20､pax5､alk､ema､ae1/ae3等｡cd30､cd15､pax5在霍奇金淋巴瘤中的阳性率分别为91%､67%及62%[2]｡某些间变性大细胞淋巴瘤可有霍奇金样细胞,但其肿瘤细胞大小及核型呈明显的多形性,除cd30阳性性,还可表达ema和/或alk[13];而富于t或组织细胞的大b细胞淋巴瘤cd20阳性,缺乏hrs细胞;转移癌ae1/ae3阳性,细胞可有相应的分化特点,如腺癌细胞构成三维立体结构､鳞癌细胞可见角化珠或嗜酸性胞浆等｡此外,cd30亦可表达于活化的b细胞和t细胞｡因此,了解chl的形态特征及鉴别诊断,在发现特征性肿瘤细胞的基础上,用最少的免疫细胞化学染色证实hrs细胞,除外反应性淋巴细胞､癌细胞及非霍奇金淋巴瘤是细针穿刺诊断的关键[11]｡

综上所述,细针穿刺操作简单,且细胞形态保存较好,有利于及时发现诊断性hrs细胞,辅以免疫染色,有助于chl的诊断,其诊断的准确性可达到80%以上｡但是细针穿刺无法对chl进行分型,需要进一步组织学检查明确｡因此,细针穿刺在chl诊断中的意义在于及时发现病变,分流患者,并进一步指导后续的组织学活检及临床处理｡

参考文献:

4崔娣,陈争先,刘龙腾,等.细胞转移技术在细针穿刺细胞学诊断中的应用.中华病理学杂志,2021,50(6):615-619.

7刘念,李金男,朱向兰,等.细针穿刺诊断伴肉芽肿和凝固性坏死的经典型霍奇金淋巴瘤1例.临床与实验病理学杂志,2021,37(4):501-502.

8尹艳华,于钢,任玉波.细针穿刺诊断富于分叶核细胞的霍奇金淋巴瘤1例报告.山东医药,2005,45(36):76.

9杨巧,王佩,王璐.甲状腺细针穿刺细胞学诊断霍奇金淋巴瘤1例.诊断学理论与实践,2019,18(2):215-217.

10于慧,王莉,朱华渊,等.56例伴纵隔大包块淋巴瘤患者的临床特征及预后分析.中国实验血液学杂志,2020,28(2):495-499.

13王春艳,聂志,崔进,等.霍奇金样型间变性大细胞淋巴瘤3例及文献复习.昆明医学院学报,2008,29(4):102-105.

文章来源:陈岚,刘周英,陈争先,等.细针穿刺在经典型霍奇金淋巴瘤诊断中的应用及临床病理分析[J].中国实验血液学杂志,2025,33(04):1047-1050.